Caracterização funcional de Nop53/PICT1: modulação da biogênese ribossomal, atividade do exossomo, e efeito sobre o ciclo celular

Resumo

Os ribossomos são complexos ribonucleoproteicos altamente conservados responsáveis pela tradução dos RNAs mensageiros (mRNA), catalisando no citoplasma a síntese proteica. Em eucariotos, são constituídos pelas subunidades 40S e 60S, sendo a primeira composta pelo RNA ribossomal (rRNA) 18S e 33 proteínas ribossomais, enquanto a partícula 60S é constituída pela associação dos rRNAs 25S, 5.8S e 5S com 46 proteínas ribossomais. A biogênese destes complexos tem origem no nucléolo e constitui um processo energeticamente dispendioso, altamente orquestrado, com diversas etapas, nas quais cerca de 200 proteínas não ribossomais e 76 RNAs não codificadores participam. Apesar dos recentes avanços na descrição de novos fatores de montagem, na descoberta dos mecanismos de processamento do rRNA, e na caracterização estrutural das subunidades em diferentes estágios de maturação, a função específica desempenhada pelas diversas proteínas não ribossomais na formação e maturação das subunidades pré-40S e pré-60S ainda permanece por ser elucidada. Nop53, uma proteína nucleolar essencial em Saccharomyces cerevisiae, afeta etapas tardias da maturação da subunidade pré-60S e interage com fatores de processamento do rRNA, dentre os quais a subunidade catalítica do exossomo, Rrp6, e com o rRNA 5.8S, processado pelo exossomo. A proteína humana PICT1 (GTSCR2), ortóloga de Nop53 também foi encontrada na subunidade pré-60S e descrita como sendo um supressor de tumor. Apesar dos avanços na descrição de Nop53 e de PICT1, seu papel na biogênese da subunidade ribossomal maior, bem como sua influência sobre a atividade exonucleolítica do exossomo ainda permanecem pouco compreendidos. Este projeto tem por principal objetivo a caracterização funcional da proteína nucleolar Nop53 em S. cerevisiae elucidando seu papel na biogênese ribossomal, no ciclo celular e na modulação da atividade do exossomo eucariótico, verificando-se os mecanismos pelos quais ela afeta o nível de expressão de Rrp6. (AU)