Papel dos receptores para peptídeos formilados e do peptídeo mimético da anexina a1 na alergia ocular

Resumo

A conjuntivite alérgica (CA) representa uma doença complexa do sistema imune envolvendo uma resposta inflamatória e consequente desordens oculares, podendo levar à diminuição da acuidade visual e cegueira. Nos tratamentos das inflamações intra-oculares, em geral, são os glicocorticóides os medicamentos administrados cujos efeitos colaterais estimulam buscas por novas estratégias terapêuticas. Nesse aspecto, a proteína anexina A1 (ANXA1) atua como um potente mediador endógeno das ações anti-inflamatórias que podem ser ativadas por receptores para peptídeos formilados (fprs). Contudo, a expressão da ANXA1 e de seus fprs em tecidos oculares normais e inflamados tem sido pouco explorada. Desse modo, analisaremos em um modelo experimental de CA murino, a expressão dos receptores fpr1 e fpr2 e sua relação com a proteína ANXA1. Camundongos machos Balb/c serão imunizados nos dias 0 e 7, por via subcutânea, com ovalbumina (OVA; 5 µg) e nos dias 14, 15 e 16, receberão instilação direta no saco conjuntival de OVA (250 µg em 10 µL de salina estéril). Outro grupo de animais sensibilizados serão pré-tratados i.p. nos dias 14 a 16 com o peptídeo mimético da ANXA1 (Ac2-26; 100 mg/Kg), Boc2 (10 mg/animal), antagonista dos receptores fprs, ou Ac2-26+Boc2 diluídos em 0,1 mL de salina. Os animais controles receberão apenas salina. Após 24 horas do último desafio com OVA, os animais serão eutanasiados para coleta de sangue, olhos, pálpebras e baço. Os estudos serão realizados por meio de: dosagem de IgE anti-ovalbumina por ELISA no sangue; análises morfológica e quantitativa dos mastócitos e eosinófilos nas conjuntivas palpebrais; imuno-histoquímica para detectar a expressão dos fpr1 e fpr2 nas pálpebras; Western blotting para detectar a expressão dos fprs, das quinases ativadas por mitógenos (MAPKs), protease 6 dos mastócitos e peroxidase eosinofílica nos macerados de olhos e baço. Os resultados contribuirão para o melhor entendimento da participação dos fprs e sua relação com a ANXA1 nos processos inflamatórios oculares alérgicos.