Caracterização imunoproteômica de Brucella canis para identificação de proteínas candidatas a antígenos para sorodiagnóstico

Resumo

A brucelose canina é uma zoonose que ocasiona perdas econômicas aos criadores de cães em decorrência do comprometimento dos órgãos reprodutivos. É uma doença bacteriana infecciosa causada pela Brucella canis, considerada endêmica e negligenciada no Brasil. A infecção é de difícil diagnóstico em razão da ausência de testes sorológicos acurados disponíveis, em especial para a identificação de cães cronicamente infectados. O objetivo do presente projeto é realizar análise proteômica de uma cepa de campo de B. canis isolada no Brasil com o intuito de identificar proteínas imunogênicas candidatas a serem utilizadas como antígenos para testes sorológicos para o diagnóstico da infecção. Um painel composto de soros caninos obtidos de 17 cães em amostrados em diferentes fases da infecção (em bacteremia e em ausência de bacteremia) será empregado, assim como soros de cinco cães não infectados, a serem usados como controles negativos. Será realizada a extração de proteínas da cepa de B. canis seguida da separação proteica por eletroforese bidimensional. O perfil proteico obtido será avaliado, pelo método de Western blotting frente ao painel de soros caninos, com objetivo de identificar proteínas imunogênicas que sejam marcadores das diferentes fases da infecção. As proteínas selecionadas serão submetidas à espectrometria de massas (MALDI-TOF-MS) para sua identificação proteica.