Atividade antimicrobiana de metabólitos produzidos por Streptococcus mutans sobre Candida albicans em modelos de estudo in vivo

Resumo

Estudos realizados in vitro tem demonstrado que Streptococcus mutans podem produzir metabólitos capazes de inibir Candida albicans, tornando interessante a identificação e desenvolvimento de novas substâncias para o tratamento da candidose bucal. Assim, o objetivo desse estudo será purificar e identificar os metabólitos produzidos por S. mutans e avaliar seus efeitos sobre a patogenicidade de C. albicans e a resposta imunológica em modelos de estudo in vivo. Os metabólitos do sobrenadante da cultura de S. mutans serão extraídos com acetato de etila e posteriormente fracionados e identificados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência com Detector de Arranjo de Diodos (CLAE-DAD). A seguir, será avaliada a ação desses metabólitos sobre a candidose experimental induzida em Galleria mellonella e em camundongos imunossuprimidos. No modelo de infecção experimental com G. mellonella, os efeitos dos metabólitos serão analisados pelos testes de curva de sobrevivência, quantificação de UFC/mL de C. albicans na hemolinfa, fagocitose e determinação da densidade hemocitária das lagartas de G. mellonella. O metabólito de S. mutans que apresentar maior atividade antimicrobiana sobre C. albicans em G. mellonella será selecionado para o estudo de candidose bucal em camundongos. Nesse modelo experimental, o desenvolvimento de candidose será avaliado pelos testes de recuperação e determinação de UFC/mL de C. albicans da cavidade bucal, análise macroscópica e microscópica do dorso da língua, e quantificação de citocinas no soro dos animais. Os resultados dos experimentos de sobrevivência em G. mellonella serão analisados pelo teste de Log-rank (Mantel-Cox). Os dados obtidos nos demais testes serão submetidos a uma análise exploratória para a seleção do teste estatístico mais adequado para cada experimento. Em todos os testes será utilizado o programa GraphPad Prism 5.0, considerando-se nível de significância de 5%.