Prospecção de alternativas terapêuticas inovadoras para doenças infecciosas de interesse odontológico: jato de plasma frio sob pressão atmosférica e nanoencapsulado de substância bioativa

Resumo

Algumas doenças infecciosas representam grande desafio na Odontologia devido à crescente prevalência, escassas opções terapêuticas e/ou aumento da resistência antimicrobiana. Considerando que a busca por novas terapias é altamente necessária, este projeto pretende prospectar alternativas terapêuticas inovadoras, avaliando a aplicabilidade do jato de plasma frio sob pressão atmosférica (LTAPP) e de nanoencapsulados da substância bioativa ácido elágico (NAE) no tratamento da candidose bucal e doença periodontal (DP). Para atingir este objetivo, o projeto será dividido em 3 subprojetos: 1) Avaliação do potencial do LTAPP e NAE no tratamento da candidose bucal: serão determinadas as condições físicas ideais do LTAPP para células planctônicas e biofilmes de C. albicans. O ácido elágico em concentração com comprovada atividade antifúngica (determinada em estudo prévio) será complexado em ciclodextrina e caracterizado por calorimetria diferencial de varredura, microscopia eletrônica de varredura e análise do perfil de dissolução. Após série de avaliações in vitro, a efetividade das terapias será avaliada em modelo murino de candidose bucal induzida. Para elucidar possíveis mecanismos de ação serão realizados ensaios para verificação dos efeitos sobre a integridade de parede celular e membrana plasmática, níveis de ergosterol, morfogênese, produção de exoenzimas, aderência às células epiteliais e efeito sobre expressão dos genes SAPs, HWP1 e ALS em C. albicans. 2) Potencial do LTAPP como adjuvante no tratamento da doença periodontal: Serão avaliadas as atividades do LTAPP sobre as principais espécies bacterianas envolvidas na DP por qPCR. Os efeitos sobre a interação biofilme-hospedeiro e resposta tecidual serão analisados por meio de análise proteômica (in vitro), da reabsorção óssea e das citocinas envolvidas no processo (in vivo). 3) Análise do potencial cito e genotóxico do LTAPP e NAE nas condições efetivas para o tratamento da candidose bucal e da periodontite: Serão utilizados ensaios de viabilidade celular, TUNEL, alterações metanucleares, micronúcleos e ploidia do DNA, efeitos sobre o ciclo celular, detecção de ROS e genotoxicidade em modelo de microesferas. Para NAE será utilizado também o modelo de Drosophila melanogaster. Os dados serão analisados estatisticamente, inicialmente por teste de normalidade da distribuição amostral e, a seguir, por análise específica adequada. O nível de significância será de 5%. (AU)