Avaliação de hepatócitos derivados de hiPSC como modelo para estudo da responsividade a losartan in vitro

Resumo

Um grande desafio para a pesquisa de novos fármacos é o estabelecimento de modelos biológicos consistentes para a investigação de toxicidade e eficácia dos mesmos. Estima-se que cerca de 90% de novos fármacos testados em ensaios clínicos não são aprovados e os aprovados são eficazes em apenas 30% dos indivíduos. O estudo desta variabilidade interindividual a fármacos envolve diversos fatores e exige maior entendimento da metabolização de substâncias pelo fígado. Hepatócitos são responsáveis pela geração de metabólitos ativos ou tóxicos e pela depuração de substâncias através de um conjunto de enzimas do Citocromo P450 (CYPs). Sabe-se que polimorfismos nos genes que codificam os CYPs podem influenciar as variações nas respostas aos medicamentos. Nesse sentido, células do tipo hepatócitos (hepatocyte-like cells - HLCs) derivadas de hiPSC podem representar uma importante ferramenta para triagem de fármacos. No presente estudo, propomos obter HLCs a partir de hiPSC (human induced Pluripotent Stem Cell) provenientes de pacientes respondedores e não respondedores ao Losartan, participantes do Estudo Longitudinal da Saúde do Adulto (ELSA - Brasil), e correlacionar o genótipo dos CYPs envolvidos na metabolização do fármaco com a taxa de metabolização pelos respectivos HLCs. Essas células serão caracterizadas e tratadas com Losartan e seus sobrenadantes serão coletados para quantificação dos metabólitos através da técnica de HPLC. Ao que diz respeito às análises dos CYPs, o DNA das células será extraído e genotipado afim de procurarmos polimorfismos nos CYPs 2C9 e 3A4 que possam condizer com o fenótipo observado in vivo.Pretendemos com este estudo elaborar um modelo in vitro que nos permita verificar a predição de resposta a fármacos de diferentes perfis metabólicos. (AU)