Enterococcus faecalis: Desenvolvimento de irrigante final para destruí-lo, análise de sua sobrevivência após tratamento endodôntico e sua capacidade de estimular citocinas pró-inflamatórias após ser estressado.

Resumo

O presente estudo constará de três fases. Na etapa 1 o objetivo é desenvolver um novo agente quelante final, com maior capacidade antisséptica; Na etapa 2 se avaliará a prevalência de bactérias persistentes no canal radicular após tratamento endodôntico empregando a solução de EDTA nova que apresentou melhores resultados na etapa 1 através de técnica de ATP-bioluminescência. Na etapa 3 será computar a produção de citocinas pró-inflamatórias por macrófagos frente a bactérias Enterococcus faecalis na forma de biofilme e planctônica estressadas. Materiais e Métodos: Etapa 1: 5 agentes quelantes serão testados (N=10) . Exp. 1- A produção de smear layer será induzida em blocos de dentina e sua remoção pelos irrigantes avaliada através de MEV. Exp. 2 - Sobre blocos de dentina será induzido o biofilme in vitro de Ent. faecalis, sendo a capacidade antimicrobiana de cada irrigante testada por 5 minutos e quantificada através de microscopia confocal e do programa bioimage. Exp. 3 - Blocos de dentina serão tratados com os irrigantes em questão, sendo em seguida, aferida a adesão de Ent. faecalis a dentina. Exp. 4- A determinação da molhabilidade dos irrigantes se dará pelo método da gota séssil. Exp. 5 - Dentes bovinos obturados através de cimento AH plus terão suas raízes seccionadas, em seguida o teste de push-out será realizado na máquina de ensaios universal MTS 810. Exp. 6 - A citotoxidade será avaliada através de redução do XTT, avaliação do vermelho neutro e cristal de violeta. Etapa 2: Exp. 1 e 2 - A contaminação do canal radicular e intra-tubular (N=10) será realizada com Ent. faecalis. Em seguida 5 protocolos de tratamento serão realizados e após 3 meses a avaliação de micro-organismos persistentes ocorrerá através do método de ATP-bioluminescência. Etapa 3: A mensuração da produção de citocinas pró-inflamatórias por macrófagos frente a Ent. faecalis na forma de biofilme estressado através da medicação intracanal será aferida pelo teste de Elisa.