Secreção de proteínas em Trypanosoma

Resumo

O objetivo deste projeto de pós-doutorado é identificar e caracterizar os componentes envolvidos na secreção de proteínas ancoradas por glisosil-fosfatididilinositol (GPI) de T. cruzi. Trata-se de um projeto exploratório, feito em colaboração com o Dr. Mark Field da Universidade de Dundee, colaborador neste projeto, que tem bastante experiência na descrição do tráfego intracelular de proteínas em T. brucei (Leung, Riley et al. 2011, Alsford, Field et al. 2013). Exploraremos dois aspectos. Um deles é relacionado a identificação e caracterização funcional das proteínas da família das p24, envolvidas o tráfego do reticulo endoplasmático para o Golgi. O outro, a ser realizado em paralelo contemplará a caracterização do sistema de ubiquitinação/deubiquitinação em T. cruzi formado pela deubiquitinase Usp33 e a proteína ring Rbx1, descritas como importante na endocitose das proteínas de superfície de T. brucei (Zolter et al., 2015, no prelo, PlosPathog). De maneira específica procuraremos: 1) gerar linhagens de T. brucei para RNAi das proteínas p24 e analisar o fenótipo dos parasitas quanto a expressão de proteínas de superfície; 2) caracterizar os complexos formados com as proteínas Usp33 e Rbx1 de T. cruzi após inserção de etiquetas e análise por proteômica diferencial; 3) gerar linhagens superexpressores ou nocautes de T. cruzi das proteínas Rbx1 e Usp33. (AU)