Desenvolvimento e caracterização de nanodispersão de fase líquido-cristalina como sistema carreador multifuncional de siRNA TNF-alfa e Triptolida no tratamento tópico da psoríase

Resumo

A psoríase é uma doença inflamatória cutânea crônica, imunomediada, que dependendo do grau e tipo, pode afetar a pele, unhas, mucosas e articulações, e pode estar potencialmente associada à inflamação sistêmica. O tratamento da psoríase é realizado de forma a obter períodos prolongados de remissão da doença e melhora da qualidade de vida do paciente. A terapia farmacológica consiste no uso de análogos da vitamina D3 e retinóides em associação aos corticoesteróides, e nos casos mais graves recomenda-se agentes imunossupressores e quimioterápicos, associada à terapia tópica e fototerapia. Embora a maioria dos regimes terapêuticos estabelecidos seja razoavelmente eficaz como terapia de curto prazo, devido ao perfil de segurança desses fármacos, seu uso por um logo prazo é limitado, o que dificulta o controle da doença. Esforços estão sendo feitos no desenvolvimento de nanopartículas para aplicações dermatológicas, com o propósito de proporcionar uma liberação sustentada dos fármacos, reduzir a toxicidade e aumentar a adesão do paciente ao tratamento. A triptolida, um diterpeno com um grupamento triepóxido, apresenta atividade anti-inflamatória, imunossupressora, anti-cistogênese e anti-tumoral. Atualmente, a utilização de nanocarreadores demonstraram resultados promissores para uso tópico e redução da toxicidade inerente à molécula. A terapia gênica por silenciamento gênico utilizando siRNAs é uma nova modalidade terapêutica, e a sua entrega tópica pode modular estrategicamente a expressão dos genes responsáveis por uma variedade de distúrbios, e já são estudadas diversas potenciais aplicações para a terapia com siRNA para doenças de pele. Neste contexto, o presente projeto visa o desenvolvimento de uma dispersão fase líquido-cristalina multifuncional que associa siRNA TNF-± com o fármaco triptolida. A nanodispersão será analisada quanto ao tamanho de partícula e índice de polidispersibilidade, potencial zeta, calorimetria diferencial de varredura, rastreamento de partículas, microscopia de força atômica, microscopia de luz polarizada e difração de raio-x, estabilidade física das partículas, eficiência de complexação/ descomplexação do siRNA ao sistema, eficiência de encapsulação do fármaco e ensaios in vitro de liberação utilizando membrana sintética e permeação/ retenção com pele de orelhas de suínos, utilizando células de difusão de Franz. Também será avaliada a capacidade de captação celular do complexo siRNA-nanodispersão em cultura celular de fibroblastos através dos estudos de viabilidade celular por método de resazurina, captação celular por microscopia confocal e citometria de fluxo e avaliação da eficácia do silenciamento em modelo in vitro de inflamação. A estratégia experimental sugerida neste projeto resultará em um estudo de viabilidade tecnológica e terapêutica de cristais líquidos multifuncionais para a terapia tópica da psoríase.