Produção e caracterização de células dendríticas polarizantes aDC1 para protocolo clínico de imunoterapia anti-HIV

Resumo

A imunoterapia baseada em células dendríticas derivadas de monócitos (MoDCs) constitui uma estratégia promissora para o tratamento de indivíduos infectados pelo HIV. Devido à sua notória plasticidade, populações heterogêneas de MoDCs podem ser obtidas in vitro, dependendo das condições da cultura. No contexto da infecção pelo HIV é desejável o desenvolvimento de MoDCs capazes de produzir altos níveis de IL-12p70 e por consequência, induzir a diferenciação de linfócitos T virgens em células T produtoras de IFN-³ (perfil Th1). O presente projeto tem por objetivo a produção e caracterização de uma vacina anti-HIV baseada em células dendríticas polarizadas do tipo alfa-1 (aDC1). As aDC1 serão produzidas a partir de monócitos e diferenciadas em MoDCs imaturas após incubação com GM-CSF e IL-4 durante 6 dias. Subsequentemente as células serão incubadas com vírus autólogo inativado por aldrithiol-2 (AT-2) e ativadas utilizando-se IFN-g e ácido polinosínico-policitidílico (poli-I:C), juntamente com o coquetel de ativação composto por TNF-a, IL-1B, IL-6, IFN-a e PGE2 durante mais 2 dias. O HIV autólogo será isolado a partir de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de cada indivíduo e será expandido em células alogênicas provenientes de doadores saudáveis. A fim de caracterizar o produto vacinal serão estudados aspectos fenotípicos (expressão de moléculas que participam do processo de apresentação antigênica, como por exemplo, MHC, moléculas de adesão, coestimuladoras, e de migração) e funcionais (capacidade de secretar citocinas, potencial migratório e habilidade em gerar resposta T específica para o HIV) dos precursores (monócitos) e das aDC1 no estágio imaturo e ativado. Finalmente, os dados obtidos in vitro serão correlacionados aos resultados obtidos no protocolo clínico. (AU)