Papel dos endocanabinóides na modulação de células de papila apical: estudo in vitro

Resumo

A papila apical desempenha um importante papel na formação das raízes durante o desenvolvimento dentário, atuando como fonte de células-tronco que se diferenciam em células responsáveis pela síntese de dentina, os odontoblastos. A inflamação pulpar em dentes imaturos, resultante de cáries ou trauma, pode levar à necrose e à interrupção da formação das raízes. Entre os mediadores inflamatórios potencialmente envolvidos nesse processo, os endocanabinóides (ECbs) anandamida (AEA) e 2-araquidonoilglicerol (2-AG) podem afetar o comportamento das células da papila apical. Portanto, o objetivo deste estudo é investigar o papel dos ECbs nos mecanismos moleculares mediados pelo receptor potencial transitório vanilóide tipo 1 (TRPV1), envolvido nas alterações fenotípicas e funcionais das células da papila apical in vitro. Cultura de células-tronco da papila apical (SCAP) serão utilizadas entre a 3ª e a 5ª passagem. As células serão pré-tratadas com capsazepina (um antagonista de TRPV1), seguido de estimulação com AEA, 2-AG ou LPS por 1, 3, 7 e 14 dias. Logo após, as células serão submetidas a ensaio de viabilidade, determinação de citocinas e quimiocinas por ELISA, vermelho de Alizarina para análise de deposição de cálcio e RT-qPCR para determinação do perfil de diferenciação celular. Para a análise estatística será utilizada análise de variância unidirecional (ANOVA), seguida de pós-teste de Tukey ou teste t de Student. Valores significativos serão definidos em p <0,05.