Identificação de compostos que interagem com a MurE de Mycobacterium tuberculosis através da triagem de fragmentos

Resumo

Tuberculose é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium tuberculosis e afeta cerca de 10 milhões de pessoas por ano em todo o mundo, sendo uma das principais causas de morte por infecções. A terapia usada no tratamento da tuberculose é complexa e exige no mínimo 3 diferentes medicamentos relativamente tóxicos por um período de aproximadamente 6 meses, que facilita a desistência do paciente e surgimento de cepas resistentes. Entretanto, apesar disso, somente recentemente, depois de um período de cerca de 40 anos, dois novos medicamentos foram introduzidos no mercado para o tratamento de tuberculose multirresistente. Dessa forma, novas estratégias de terapia contra a tuberculose são necessárias e a biossíntese do peptídeoglicano da parede celular de Mycobacterium tuberculosis apresentam alvos interessantes para o desenvolvimento de novos fármacos, uma vez que esta é uma estrutura processo essencial para a sobrevivência da micobactéria. Assim, a enzima MurE de Mycobacterium tuberculosis (MtMurE) que é uma ligase dependente de ATP e participa da formação do UDP-MurNac-Pentapeptídeo no citoplasma é um alvo essencial e viável para o desenvolvimento de novos fármacos. Esta enzima está envolvida nos primeiros passos da biossíntese de peptídeoglicano, porém tem sido muito pouco explorada como um alvo para o desenvolvimento de fármacos, principalmente considerando de um ponto de vista estrutural. Sendo assim, neste projeto, pretendemos realizar a identificação de compostos que interajam com a MurE através da aplicação da técnica de desenho de fármacos baseado em fragmentos. Para isso será realizada a superexpressão da enzima em sistema heterólogo e esta será purificada utilizando colunas de afinidade e de gel filtração. Posteriormente a MtMurE será triada contra uma biblioteca de moléculas de baixo peso molecular. Tentativas de se obter estrutura da MtMurE em complexos com as moléculas identificadas serão realizadas. Os resultados obtidos neste projeto serão o ponto de partida para síntese de compostos que apresentam atividade inibitória para a MtMurE e candidatos para o desenvolvimento de novas moléculas com atividade antituberculose.