Genômica comparativa e atividade antimicrobiana de endolisinas fágicas recombinantes contra bactérias gram-negativas multirresistentes

Resumo

Bactérias Gram-negativas como Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter spp., Salmonella e Helicobacter pylori são bactérias multirresistentes de interesse clínico. Endolisinas fágicas recombinantes surgem, portanto, como novos antimicrobianos potenciais para combater as infecções causadas por bactérias Gram-negativas resistentes a antibióticos. O alvo de ação das endolisinas é o peptidoglicano, estrutura altamente conservada responsável a integridade da célula bacteriana. Estudos mostram que a principal barreira para a aplicação exógena de endolisinas contra bactérias Gram-negativas é a baixa permeabilidade da membrana lipopolissacarídica. Dessa forma, o objetivo do presente projeto é desvendar os marcadores evolutivos selecionados na associação de ecologia fago-endolisina-hospedeiro em bactérias Gram-negativas de interesse clinico e avaliar a atividade antimicrobiana de endolisinas modificadas de amplo espectro de ação contra bactérias Gram-negativas multirresistentes. Endolisinas de amplo espectro de ação serão selecionadas, modificadas e clonadas a partir da comparação da taxa evolutiva de endolisinas fágicas codificadas por bacteriófagos espécie-específicos para as bactérias selecionadas. A atividade antibacteriana das enzimas purificadas será avaliada in vitro e em modelos in vivo de Galleria mellonella e/ou camundongos BALB/c na presença e na ausência de agentes permeabilizantes. O presente projeto apresenta como inovação a busca por endolisinas fágicas de amplo espectro de ação contra bactérias Gram-negativas multirresistente por meio da seleção de motivos proteicos apropriados e/ou mutação e construção de enzimas geneticamente modificadas para ação exógena como possíveis tratamentos alternativos às infecções causadas por bactérias resistentes a antibióticos. (AU)