Validação interespécies de proteínas candidatas na carga proteômica de exossomos séricos para diagnóstico precoce e prognóstico de pacientes com câncer de mama triplo negativo

Resumo

O tumor de mama (TM) canino é um modelo clínico valioso para o câncer de mama (CM) em mulheres pois compartilha semelhanças etiológicas, clínicas, histopatológicas, moleculares e de prognóstico com a doença em humanos. A combinação da expectativa de vida inerentemente mais curta dos cães, a manifestação da doença espontânea e a etiologia multifatorial, permite uma coleta de dados aprimorada e facilita o desenvolvimento de um modelo clínico pragmático. Além disso, uma comparação da proteômica de exossomos circulantes, entre pacientes com neoplasia mamária dessas duas espécies, nunca foi realizada. A biópsia líquida como uma plataforma confiável para a descoberta de proteínas candidatas a biomarcadores de CM poderá determinar o diagnóstico precoce e prognóstico para ambas as espécies. Neste estudo, propomos isolar exossomos extraídos do soro de fêmeas caninas e mulheres, com diagnóstico de neoplasia mamária triplo-negativo, em diferentes momentos e estágios da doença (pré e pós-cirúrgico, recidiva/metástase e remissão). Em seguida, investigar a carga proteômica exossômica por meio de espectometria de massas por cromatografia líquida (LC-MS/MS) e comparar com aquela observada em exossomos de pacientes saudáveis e curadas, correlacionando esses achados com a classificação histológica e fenotípica, grau e estágio da doença. Buscaremos verificar os achados da proteômica para a identificação de proteínas candidatas a biomarcadores tumorais, para entender sua interação mútua, bem como seu possível papel na tumorigênese mamária canina e humana. A fim de confirmar os impactos do papel de comunicação dos exossomos com o meio extracelular e outras células, será realizado o co-cultivo dos exossomos isolados do soro das pacientes frente às linhagens epiteliais não tumorais mamárias HB4a/MCF-10A.Os resultados deste estudo irão, em última análise, promover o modelo de biópsia líquida com painel de biomarcadores que permitirá o diagnóstico precoce, sensível e específico da neoplasia mamária primária e metastática. (AU)