Identificação de carioferinas envolvidas na importação nuclear das subunidades do exossomo em Saccharomyces cerevisiae

Resumo

O complexo exossomo é uma das maquinarias mais versáteis de degradação de RNA em eucariotos, desempenhando papel relevante na biogênese de diversos RNAs (rRNAs, snoRNAs, snRNAs, ncRNAs) e na regulação dos níveis de expressão de mRNA específicos tanto no núcleo quanto no citoplasma. O exossomo atua em várias etapas diferentes de processamento e degradação de RNA possuindo atividade exoribonucleolítica 3'-5' que está envolvida no processamento e degradação de todos os tipos de RNA. Em eucariotos, dependendo da localização na célula, o exossomo pode variar em sua composição e forma de ação e ter substratos diferentes: o exossomo nuclear participa da maturação de diversos RNAs e na degradação de pré-mRNAs instáveis. Já no citoplasma, o exossomo está envolvido no controle dos níveis de mRNA na célula e na degradação de mRNAs aberrantes. O complexo exossomo é formado por dez subunidades no citoplasma (Exo10) e onze subunidades no núcleo (Exo11). Das onze subunidades, somente Rrp6 (exclusivamente nuclear) e Rrp44 têm atividade catalítica e cada uma se liga em lados opostos do core do complexo. No citoplasma, o exossomo interage com o complexo Ski através de Ski7 para o reconhecimento e degradação de RNAs aberrantes. No núcleo, o exossomo é altamente concentrado no nucléolo, onde o pré-rRNA é transcrito e o processamento é iniciado. Apesar da função do exossomo já ter sido extensivamente estudada, não se tem um conhecimento detalhado dos mecanismos de transporte para o núcleo, ou retenção no citoplasma. O presente projeto propõe o estudo do transporte do exossomo para o núcleo através da identificação das carioferinas responsáveis por esse processo e a investigação da importância do complexo Ski em manter o exossomo no citoplasma utilizando a levedura Saccharomyces cerevisiae como modelo de eucariotos nesses estudos. (AU)