Desvendando o mecanismo de formação do PAQossomo: um sistema envolvido na maturação de complexos proteicos

Resumo

O PAQossome (do inglês Particle for Arrangement of Quaternary structure) é um sistema proteico de função singular, recentemente descoberto quando algumas das funções dos seus componentes foram desvendadas. Seus componentes incluem o complexo R2TP (do nome das suas proteínas Rvb/RUVBL1/2, Tah1 e Pih1) e a prefoldina. Esse sistema está envolvido na formação e amadurecimento de diversos complexos multiproteicos em eucariotos superiores. Além da prefoldina, o complexo R2TP interage com o chaperoma celular via ligação de Tah1 com a HSP90 (heat shock protein de 90 kDa). Tah1 é o nome da proteína em levedura, a qual tem apenas 111 resíduos e em humano é chamada de RPAP3, a qual possui 665 resíduos, por ter domínios não encontrados em Tah1. Nosso grupo de pesquisa e colaboradores temos divulgado resultados importantes sobre a estrutura e função do sistema R2TP em humano e levedura e nesse projeto temos como objetivo explorar as diferenças entre Tah1 e RPAP3 incluindo o estudo das proteínas de outros organismos, uma vez que parece ocorrer um aumento de complexidade, averiguada principalmente pela extensão da cadeia polipeptídica e inclusão de domínios entre todas as proteínas a serem estudadas. Os objetivos específicos desse projeto incluem a produção das proteínas recombinantes e a investigação do sistema PAQossomo por duas perspectivas: a primeira é o estudo a interação entre a RPAP3/Tah1 e HSP90 por meio de técnicas espectroscópicas, calorimétricas e computacionais, com isso buscamos descrever a constante de afinidade, os parâmetros termodinâmicos e o modo de ligação, a fim de elucidar o mecanismo pelo qual a HSP90 interage com as diferentes estruturas; a segunda é caracterização da conformação dos oligômeros formados pelas proteínas RUVBL1/2 de Aedes aegypt. Os resultados esperados possuem potencial para aumentar nosso conhecimento sobre esse complexo em particular e, de maneira geral, sobre a formação e maturação de complexos proteicos pela célula. (AU)