Combinação de estratégias ômicas pode indicar potenciais alvos envolvidos na iniciação de câncer oral por meio da comunicação de vesículas extracelulares

Resumo

Este projeto tem o objetivo de combinar estratégias ômicas para responder às hipóteses reducionistas de que (1) o álcool altera vesículas extracelulares (EVs) derivadas de fibroblastos quiescentes ou não ativados e queratinócitos, (2) as EVs alterados pelo álcool podem modificar o fenótipo do microambiente celular, (3) as proteínas selecionadas das EVs são candidatas a alvos terapêuticos. Na primeira hipótese, o pesquisador de pós-doutorado (PD) será responsável por avaliar miRNA, proteína, metabólitos e composição lipídica de EVs derivadas de fibroblastos e queratinócitos tratados e não tratados com álcool. Na segunda hipótese, o PD realizará microdissecção a laser seguida por single-cell RNAseq e proteômica baseada em descoberta do sítio primário e em tecidos de linfonodo de um modelo ortotópico, injetado com EVs derivadas de fibroblastos e de queratinócitos tratados e não tratados com álcool. A expressão proteica de potenciais candidatos indicados por meio de estudos in vitro e em animais será avaliada em um fenótipo alterado conhecido - as amostras humanas - , usando EVs de biópsias e EVs de plasma de lesões orais potencialmente malignas (leucoplasia) e carcinoma de células escamosas oral em estágio inicial (T1/2N0 e T1/2N+) com abordagens de proteômica baseada em alvos. Por fim, na terceira hipótese, os candidatos selecionados serão testados como alvos terapêuticos. Em resumo, este projeto irá integrar dados de modelos in vitro e de animais, e de humanos para fornecer os potenciais candidatos a alvos terapêuticos envolvidos na iniciação do câncer oral.