Avaliação do potencial protetor da CaneCPI-5, Stn15pSpS ou Hb, isolados ou combinados contra desafios erosivos in vivo: comparação entre soluções de bochecho e filmes orodispersíveis

Resumo

Na primeira parte do projeto, realizada na University of Toronto (BEPE) será realizado o design, caracterização e avaliação de novas resinas funcionalizadas com conjugados de metacrilato-DNA hibridizados com CaneCPI-5-, Stn15pSpS- ou Hb-DNA. Fitas de DNA serão covalentemente ligadas ao metacrilato disponível comercialmente e à CaneCPI-5, Stn15pSpS ou Hb, por meio de técnicas padrão de bioconjugação. Os novos materiais serão caracterizados pelos seguintes métodos: 1H e 13C NMR, eletroforese em gel e espectrometria de massas e microscopia de força atômica. Após a adição de iniciadores por luz, o material polimerizado será testado em relação aos seguintes parâmetros: conversão do grau de polimerização (por espectroscopia de infravermelhos com transformada de Fourier - FTIR), graus de liberação (HPLC) e propriedades mecânicas (dureza Knoop, resistência à flexão e módulo de elasticidade). Os materiais desenvolvidos serão testados no Brasil em relação à sua habilidade em reduzir a erosão inicial do esmalte in vitro, em comparação a soluções contendo as mesmas proteínas/peptídeo, em modelo de erosão inicial, utilizando dureza superficial como variável de resposta. Na segunda parte do projeto serão comparados dois veículos para utilização das proteínas estudadas, isoladas ou em combinação: soluções de bochecho e filmes orodispersíveis à base de carboximetilcelulose e sorbitol. Os fatores em estudo serão o tipo de proteína/peptídeo, em 5 níveis, e o tipo de veículo, em 2 níveis (solução de bochecho ou filme orodispersível). Trata-se de um estudo cruzado e triplo cego, constituído por 10 fases paralelas, sendo que todos os voluntários participarão em todos os grupos do estudo. Em cada fase, após a profilaxia, 1 voluntário fará bochecho (10 mL, 1 min) ou depositará o filme (3 X 3 cm) sobre a língua e deixará até sua completa dissolução (aproximadamente 1 min) com uma das proteínas/combinação a serem estudadas. A quantidade de cada proteína/peptídeo adicionados ao filme será a mesma presente nos 10 mL da solução de bochecho. Após a estes tratamentos, a PAE será formada por 2 h. Após 2 h, sobre a superfície vestibular do incisivo central superior direito será fixada uma fita adesiva contendo um orifício de 4,92 mm2 de diâmetro para demarcação de área. Sobre a área demarcada, será feito desafio erosivo com 10 µL ácido cítrico 1% pH 2,5 por 10 s, sendo o ácido colocado em contato com a superfície do esmalte na área marcada utilizando-se uma micropipeta. Decorridos os 10 s, os ácidos serão aspirados e coletados para análise de cálcio, pelo método colorimétrico do arsenazo. Os dados serão checados em relação à normalidade e homogeneidade, para emprego do teste estatístico apropriado (paramétrico ou não, p<0,05). (AU)