Contribuição do fator tecidual de leucócitos e endotelial para a coagulação e inflamação

Resumo

O fator tecidual é uma glicoproteína de membrana que quando exposta ao sangue ativa a coagulação levando à formação de um trombo. A ativação da coagulação dependente de fator tecidual não é sempre benéfica. Por exemplo, o fator tecidual expresso em "células espumosas" derivadas de monócitos na placa aterosclerótica é responsável pela formação do coágulo no infarto agudo do miocárdio. O fator tecidual presente no intravascular é também parcialmente responsável pelo processo de coagulação intravascular disseminada (CIVD) que aparece em diversas condições como, por exemplo, na sepsis. Portanto, há uma relação direta entre a expressão de fator tecidual no espaço intra-vascular e estados inflamatórios (como aterosclerose e sepsis) e de ativação da coagulação. O fator tecidual é encontrado em diversos tipos celulares. O papel do fator tecidual constitutivamente expresso no tecido extra-vascular, por exemplo, em fibroblastos e células musculares lisas, como um "envelope" hemostático fora da vasculatura, assim como a sua participação na ativação da coagulação na presença de lesão endotelial, encontra-se bem estabelecido. O fator tecidual não é normalmente expresso em células em contato com o sangue, mas leucócitos e células endoteliais podem responder a estímulos extracelulares ou à própria lesão vascular expressando fator tecidual em sua superfície. Entretanto, a importância fisiológica da expressão do fator tecidual em cada uma destas células do intravascular em diferentes condições de stress é atualmente desconhecida. O principal objetivo deste projeto é empregar camundongos que seletivamente não expressam o fator tecidual em leucócitos ou no endotélio em modelos de inflamação e de ativação da coagulação. As informações obtidas nestes estudos poderão responder à seguinte questão: qual é a contribuição relativa do fator tecidual derivado de leucócitos e do endotélio para o início e manutenção da coagulação do sangue e inflamação? Durante o projeto desenvolveremos três diferentes tipos de camundongos deficientes em fator tecidual: (1) camundongos deficientes em fator tecidual em leucócitos, (2) camundongos deficientes em fator tecidual em células endoteliais e (3) camundongos deficientes em fator tecidual em uma sub-população de leucócitos, isto é em monócitos/macrófagos. Os camundongos (1) serão gerados por técnicas de transplante de stem cells deficientes em fator tecidual em camundongos "selvagens" (wild-type). Os camundongos (2) e (3) serão produzidos por procedimentos clássicos de knock-out gênico. Inicialmente, a história natural dos diferentes camundongos será estudada para caracterizar o papel do fator tecidual expresso em células do intravascular na hemostasia "normal". A seguir, empregaremos os camundongos gerados pelas técnicas acima em modelos de trombose, inflamação e infecção para melhor definir o papel do fator tecidual intravascular em estados de ativação da coagulação e inflamação que mimetizam estados patológicos. (AU)