Identificação e caracterização funcional de marcadores moleculares envolvidos no processo de formação de tumores de cabeça e pescoço por meio da análise do padrão diferencial de metilação

Resumo

A metilação de cito sinas em dinucleotideos CpG geralmente resulta na repressão da expressão gênica e está envolvida em vários processos biológicos normais tais como controle de desenvolvimento, proteção do genoma contra elementos transponíveis, imprinting genômico e inativação do cromossomo X. A metilação anormal do DNA é fortemente implicada no desenvolvimento do câncer e afeta a expressão de mais de uma centena de genes supressores de tumor ou relacionados com a regulação da proliferação e da apoptose e com o reparo do DNA. Esse fato significa que o estudo da metilação do DNA e dos elementos da cromatina associados ao silenciamento gênico e a caracterização cuidadosa dos padrões de metilação no câncer humano são muito importantes. A precisa quantificação do status de metilação de ilhas CpG pode, sem dúvida, resultar no desenvolvimento de um marcador molecular poderoso para diagnóstico e prognóstico de neoplasias e ainda levar à identificação de novos alvos terapêuticos. O objetivo geral do presente projeto é investigar o perfil de metilação de ilhas CpG em tumores de cabeça e pescoço e identificar biomarcadores candidatos para diagnóstico e prognóstico desses tumores. O presente projeto também pretende estudar os aspectos estruturais e funcionais dos marcadores obtidos e os aspectos estruturais de elementos da maquinaria de metilação do DNA e de acetilação de histonas. Os objetivos específicos incluem: (a) investigar diferenças nos perfis de metilação entre carcinomas de cabeça e pescoço e tecidos normais correspondentes por arrays de ilhas CpG e pela técnica de MSI AP-PCR; (b) realizar estudos estruturais de proteínas codificadas por genes inativados pela metilação e de proteínas com função potencial na indução e/ou sustentação do fenótipo metilado em câncer; (c) caracterizar os novos genes detectados utilizando o modelo de leveduras (nocauteamento, rastreamentos genéticos, sistema duplo-híbrido). (AU)