Clonagem, expressão heteróloga e caracterização do gene LmjF24.0320 que codifica a enzima fumarato hidratase em Leishmania major

Resumo

O presente projeto visa a clonagem, expressão, purificação e caracterização cinética da enzima citosólica fumarato hidratase (fumarase) de Leishmania major (LmFHc), um protozoário parasita flagelado responsável pela Leishmaniose que afeta 88 países, distribuídos em 5 continentes, e que causa um risco a aproximadamente 350 milhões de pessoas. As fumarases são enzimas que catalisam a hidratação reversível da molécula de fumarato em S-malato. A análise comparativa entre os genomas de tripanosomatídeos indica que Leishmania major expressa a isoforma mitocondrial que atua como parte do ciclo de Krebs e a forma citosólica, que se acredita estar envolvida no metabolismo da molécula de fumarato que é produzida no citosol por diferentes tipos de reações. Estudos recentes em tripanosomatídeos, utilizando Trypanosoma brucei e Trypanosoma cruzi como modelo, sugerem que as enzimas fumarato hidratase são essenciais para sobrevivência destes parasitas. Dentro deste contexto, os estudos aqui propostos, que constituem o primeiro passo para a caracterização bioquímica e cinética da LmFHc poderão fornecer valiosas informações para o desenvolvimento de inibidores específicos, como uma importante ferramenta no combate a Leishmaniose. (AU)