Estudos proteômicos em Peperomia obtusifolia (Piperaceae)

Resumo

Estudos fitoquímicos, associados à avaliação da atividade biológica, em Peperomia obtusifolia levou ao isolamento de uma série de metabólitos secundários bioativos, dentre eles cromanos prenilados, lignanas, amidas, flavonóides e outros derivados fenólicos. Das substâncias isoladas, merecem destaque os cromanos prenilados pela potente atividade tripanocida. Dados presentes na literatura apontam as substâncias preniladas como as principais responsáveis pelas atividades biológicas reportadas no gênero Peperomia. Estes compostos apresentam-se ainda como misturas racêmicas e/ou diasteroisoméricas, o que desperta interesse com relação às etapas biossintéticas tanto da adição de unidades prenilas quanto da ciclização e formação do anel 3,4-diidro-2H-pirano. Em consequência, é de suma importância desenvolver estudos proteômicos em P. obtusifolia. Assim, este projeto tem como principal objetivo a identificação do perfil protéico desta espécie e consequente elaboração de mapas proteômicos de referência, complementando os resultados prévios da atividade in vitro de oxidorredutases, PAL, prenil- e geraniltransferases em espécies de Piperaceae. A investigação proteômica será realizada em três etapas principais: extração, análise e identificação das proteínas. A extração do complexo protéico será desenvolvida a partir de protocolos estabelecidos pelo grupo de pesquisa da Profa. Dra. Maysa Furlan. A análise estrutural e identificação das proteínas serão realizadas por eletroforese de gel de poliacrilamida bidimensional (2D-PAGE) e espectrometria de massas (MALDI-ToF ou ESI-MS/MS). Técnicas cromatográficas, tais como cromatografia utilizando adsorventes iônicos, filtração em gel e eletroforese, serão utilizadas para o fracionamento e purificação das proteínas de interesse, sendo que também estão planejados estudos por dicroísmo circular vibracional (DCV) para determinação da estrutura secundária das proteínas isoladas.