Estudo do fenótipo osteoblástico em células-tronco mesenquimais de ratos normotensos e espontaneamente hipertensos (SHR) na presença ou não de doença periodontal

Resumo

Doenças sistêmicas tem sido associadas à episódios de hipertensão, como diabetes, hipertireodismo, dislipidemia e osteoporose. O propósito deste estudo é avaliar o potencial de desenvolvimento do fenótipo osteoblástico de células-tronco mesenquimais derivadas da medula óssea de ratos normotensos e hipertensos na presença ou não de um processo inflamatório. Para tanto utilizaremos o ensaio colorimétrico MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5- diphenyl tetrazolium bromide), dosagem de proteína total, dosagem de fosfatase alcalina, detecção e quantificação de matriz extracelular, elisaimunoensaio, e Real-Time PCR (Polymerase Chain Reactions), e análises imunoistoquímicas. Serão utilizados 20 ratos, divididos em 2 grupos: Normotensos e Espontaneamente Hipertensos (SHR), e estes serão subdivididos em outros 2 subgrupos: presença ou não de doença periodontal. Os animais serão submetidos à eutanásia 15 dias após a realização da ligadura, e neste momento será realizada a coleta da medula óssea dos fêmures dos animais. As células-tronco serão depositadas em meio de cultura apropriado até assumirem confluência. As regiões submetidas à ligadura periodontal serão removidas para o processamento laboratorial e inclusão em parafina. Algumas séries de cortes serão corados com Hematoxilina e Eosina para a realização de análise histomorfométrica. A análise dos resultados será realizada através de microscopia óptica de campo claro, e os dados obtidos serão submetidos a análise estatística. As fotografias das lâminas serão capturadas com o auxílio de uma câmera acoplada a um estereomicroscópio. (AU)