Extração de fragmentos de anticorpos monoclonais scFv por sistemas micelares de duas fases aquosas

Resumo

Grande porcentagem (70-80%) nos custos de obtenção de produtos biotecnológicos corresponde às etapas de separação e purificação a partir de sua fonte de produção, sendo necessária otimização das metodologias a empregar que assegurem boa relação custo-benefício do produto de interesse. Os sistemas micelares de duas fases aquosas apresentam-se como uma tecnologia de biosseparação apropriada, visto que proporcionam um meio adequado para a integridade das macromoléculas e permitem regular as condições experimentais possibilitando uma extração seletiva. Neste trabalho se estudará a extração líquido-líquido em sistemas micelares de duas fases aquosas formados por Triton X-114/ Tampão McIlvaine, para a extração e purificação de anticorpos monoclonais scFv a partir de cultivos de Pichia Pastoris. Estudar-se-á o efeito dos componentes químicos dos sistemas sobre a integridade da macromolécula e também será analisado o efeito de diferentes variáveis como pH, temperatura, concentração de surfactante, concentração de sais e a presença de moléculas ligantes sobre a partição e a recuperação do anticorpo scFv. Serão selecionadas as melhores condições experimentais e se aplicará um aumento de escala de até 1000 vezes seu volume inicial para testar seu potencial de aplicação na indústria. (AU)