Clonagem de um isolado brasileiro do Chrysanthemum stunt viroid e desenvolvimento de técnica molecular de diagnóstico

Resumo

No Brasil, o mercado de flores e plantas ornamentais movimenta, anualmente, cifras superiores a três bilhões de reais. O crisântemo (Dendranthema spp., Asteraceae) é considerada uma das ornamentais de maior valor comercial, sendo produzido em mais de 100 municípios do estado de São Paulo. As doenças causadas por vírus e viroides têm se tornado um problema para a cultura em diversos países, devido, principalmente, à propagação vegetativa dessa espécie, que facilita a disseminação desses patógenos. Os viroides podem causar sérios prejuízos à cultura, destacando-se o Chrysanthemum stunt viroid (CSVd, gênero Pospiviroid, família Pospiviroidae), considerado praga quarentenária A2, que induz nanismo e retarda o florescimento. No Brasil, há poucos estudos sobre esses patógenos, com um único relato, em 1990, da possível ocorrência do CSVd em crisântemo no estado de São Paulo. O presente projeto tem como objetivos: (i) caracterizar e purificar um isolado brasileiro de CSVd coletado em Atibaia, São Paulo; (ii) clonar um monômero do CSVd; e (iii) sintetizar sondas de DNA e ribossondas (sonda de RNA) de polaridade negativa para detecção do CSVd via hibridização Northern-blot e dot-blot utilizando sondas radioativas e não radioativas. (AU)