Cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem no modo column switching para análises de endocanabinóides em amostras plasma

Resumo

A Doença de Parkinson (DP) é considerada como a segunda patologia neurodegenerativa mais comum na população. Atualmente, a DP não tem cura; no entanto, os sintomas podem ser minimizados pela terapia com novos medicamentos, como o canabidiol. Os endocanabinóides, como por exemplo, a anandamida e o 2- araquidonoglicerol, são substâncias endógenas derivadas do ácido araquidônico que se ligam aos receptores CB1 e CB2, agindo como agonistas. Recentemente, estudos em animais sugerem uma possível alteração dessas substâncias do organismo desses modelos animais com DP. Entretanto, tais estudos envolvendo a quantificação desses compostos a fim de elucidar a bioquímica desta doença ainda encontram-se em estágio inicial. Nos últimos anos, a cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas sequencial com ionização electrospray (ESI) (LC-MS/MS) tem se tornado a técnica analítica de referência para análises de diversas substâncias em fluidos biológicos. A etapa de preparo de amostras tem sido requerida para o desenvolvimento de métodos cromatográficos, para eliminar os interferentes e pré-concentrar os analitos, quase sempre presentes em níveis de traços em amostras biológicas. A química analítica moderna tem sido direcionada para a simplificação, através da hifenização de técnicas, automação (high-throughput performance) e miniaturização dos sistemas analíticos. Neste contexto, destacamos a cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem no modo column switching (LC-MS/MS no modo column switching). O desenvolvimento de fases estacionárias para a primeira dimensão (1D) deste sistema analítico, como os líquidos iônicos polimerizáveis (PIL) permitem a introdução direta de fluidos biológicos em sistemas cromatográficos e pré-concentração seletiva dos analitos. A grande potencialidade dos PIL como sorvente é atribuída à sua ótima estabilidade química, física, excelente capacidade de sorção e seletividade, que podem ser ajustadas por modificações na estrutura dos monômeros de síntese. Neste projeto, PIL serão sintetizados, caracterizados por diferentes técnicas espectroscópicas e imobilizados quimicamente nas paredes internas de capilares de sílica fundida. Estes capilares serão avaliados como colunas 1D do sistema LC-MS/MS no modo column switching para a determinação de endocanabinóides em amostras de plasma de pacientes com a doença DP em terapia com canabidiol.