Estudo dos mecanismos celulares e moleculares na morte de células tumorais por peptídeos antimicrobianos

Resumo

Os peptídeos antimicrobianos (PAMs) são moléculas de defesa encontradas em diferentes organismos. Além da atividade antimicrobiana, diferentes trabalhos têm mostrado outras potencialidades desses peptídeos, entre elas a capacidade antitumoral e imunomodulação. Nosso grupo descreveu a ação citotóxica dos PAMs com estrutura b-hairpin (polifemusina, taquiplesina, protegrina e gomesina) e os mecanismos de ação que eles podem desencadear para produzir morte celular na linhagem mielóide K562 e em outros tipos celulares como melanoma, neuroblastoma e células de ovário de hamster chinês. Além disso, descrevemos que estes PAMs produzem desestruturação direta da membrana plasmática com elevadas concentrações (>20 µM), e outros tipos de morte com concentrações intermediárias. Os tipos de morte celular são variados em função do PAM utilizado, apesar de possuírem grande homologia na sua sequência e possuir similaridade estrutural. Neste projeto daremos continuidade aos estudos dos efeitos biológicos relacionados com a atividade antitumoral de quatro PAMs ²-hairpin (polifemusina, taquiplesina, protegrina e gomesina), focando na: 1) Comparação dos efeitos citotóxicos em células normais e tumorais leucêmicas identificando mecanismos de resistência aos PAMs; 2) Investigação os mecanismos de morte celular nas células tumorais de adenocarcinoma HELA, aprofundando no entendimento da entrada dos PAMs no interior da célula por métodos com imagem (microscopia confocal e photothermal heterodyne imaging) e por espectroscopia de massas, além de investigar os mecanismos de morte celular utilizando medidas multiparamétricas por PCRarray e citometria de fluxo, e avaliar a participação de glicosaminoglicanos na entrada dos PAMs na célula; 3) Determinação atividade dos PAMs em organelas como mitocôndria e retículo endoplasmático. (AU)