Análise do papel de exopolissacarídeos e DNA extracelular no escape de Streptococcus sanguinis ao sistema complemento

Resumo

Streptococcus sanguinis é uma espécie bacteriana comensal pioneira das superfícies dentárias capaz de inibir o crescimento de espécies patogênicas dos biofilmes dentários, a qual pode promover endocardites infecciosas após o acesso e persistência na corrente sanguínea. Recentemente verificamos que cepas S. sanguinis são resistentes à deposição de C3b do sistema complemento, uma opsonina importante para a opsonofagocitose bacteriana por neutrófilos (PMN) da corrente sanguínea. Além disto, dados preliminares do nosso grupo sugerem que a produção de exopolissacarídeos (EPS) e DNA extracelular (eDNA) por S. sanguinis pode influenciar na deposição do sistema complemento sobre esta espécie. O objetivo deste projeto é investigar o papel de EPS e eDNA na evasão de S. sanguinis ao sistema complemento. Para isso, a produção de EPS e eDNA será comparada entre cepas S. sanguinis isoladas de boca e da corrente sanguínea. Os efeitos da remoção de EPS e eDNA (através do tratamento prévio das cepas estudadas com dextranase ou DNase I, respectivamente) na deposição de C3b e CAM do complemento e na opsofagocitose por PMN também serão determinados. Além disto, serão construídos mutantes isogênicos de genes requeridos para a produção de EPS (gtfP) e eDNA (spxB) ou potencialmente envolvidos na ligação de S. sanguinis a eDNA (iga). O efeito destas mutações na deposição de C3b e CAM será investigado após tratamento das cepas mutantes e parental com soro humano. As cepas mutantes serão também comparadas com a cepa parental quanto à susceptibilidade à opsonofagocitose por PMN isolados de sangue humano e quanto à sobrevivência no interior destes fagócitos. Os resultados deste projeto contribuirão para elucidar os mecanismos moleculares pelos quais S. sanguinis escapa da ação do sistema complemento, o que poderá ser importante para o desenvolvimento de terapias de controle de infecções sistêmicas por estes microrganismos. (AU)