Análise das interações de Streptococcus sanguinis com células endoteliais e neutrófilos de sangue periférico humano.

• Processo: 24/14159-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2028
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Renata de Oliveira Mattos Graner
• Beneficiário: Renata de Oliveira Mattos Graner
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Débora Campanella Bastos ; Lívia Araújo Alves ; Thaís Larissa Araujo de Oliveira Silva
• Assunto(s): Células endoteliais Doenças cardiovasculares Genética molecular Neutrófilos Streptococcus sanguinis Virulência Microbiologia oral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células endoteliais | doenças cardiovasculares | Genética Molecular | neutrófilos | Streptococcus sanguinis | Virulência | Microbiologia oral

Resumo

Streptococcus sanguinis é uma espécie comensal abundante da cavidade bucal com alta capacidade de iniciar biofilmes dentários. Por mecanismos ainda pouco compreendidos, S. sanguinis é também um patógeno oportunista comum de doenças cardiovasculares, incluindo-se a endocardite infecciosa e doenças ateroscleróticas. Estudos prévios do nosso grupo de pesquisa indicam três genes consistentemente associados a fenótipos de escape ao sistema complemento e invasão de células endoteliais, os genes nox, swan e ssa_0094. Curiosamente, as proteínas codificadas por estes três genes contem domínios de ligação a glicoproteínas abundantes no soro e/ou na matriz extracelular (MEC). O objetivo deste projeto é investigar os mecanismos de interação soro-dependente de S. sanguinis com células endoteliais e neutrófilos (PMN) de sangue periférico, mediados por nox, swan e ssa_0094. Para isto, a cepa selvagem SK36 e respectivas mutantes knock-out de nox (SKnox), swan (SKswan) e ssa_0094 (SK0094) serão analisadas. Os perfis de ligação destas cepas a sete glicoproteínas abundantes no soro e/ou na MEC (fibrinogênio, plasminogênio, fibronectina, elastina, colágeno tipo I, vitronectina e laminina) serão determinados e comparados através de ensaios fluorimétricos. A invasividade em células endoteliais primárias de artéria coronária humana (HCAEC) mediada por integrinas ou receptores de ligação a estas glicoproteínas será então investigada, utilizando-se pré-tratamento de HCAEC com painel de anticorpos bloqueadores das respectivas integrinas ou receptores [alfa 5/beta 1, alfa v/beta3,alfa 5, alfa v, beta 1, beta 3, CD11c/CD18 (CR4) e CD35 (CR1)]. As mesmas cepas serão ainda comparadas quanto à capacidade de induzir NETose por PMN mediada por glicoproteínas séricas em ensaios ex vivo com sangue periférico. A interação destas cepas com PMN isolados de sangue será também comparada sob diferentes condições [presença de soro humano, soro inativado pelo calor e sem soro (PBS)], através de análises qualitativas de microscopia eletrônica de varredura (MEV) e análises quantitativas por microscopia de luz. Além disso, a participação de receptores para proteínas séricas do sistema complemento (CR1 e CR3) na ativação da NETose em PMNs expostos a S. sanguinis será avaliada utilizando-se PMN pré-tratados com anticorpos bloqueadores destes receptores. Os resultados deste projeto poderão revelar mecanismos pelos quais S. sanguinis interage com células endoteliais e PMN humanos para invadir ou manipular as funções destas células. (AU)