Receptores two-pore Channels e modulação da autofagia via TFEB-3 no hepatocarcinoma celular humano

Resumo

O hepatocarcinoma celular (HCC) é a neoplasia primária de fígado originada nos hepatócitos, infecções pelo vírus da hepatite B e C são as principais causas etiológicas do HCC, seja pela carcinogênese do vírus ou mediante cirrose. A maioria dos pacientes acometidos têm como opção o tratamento com sorafenibe, um fármaco alvo-dirigido, inibidor de multi-quinases, entretanto, o desenvolvimento de resistência após o tratamento com sorafenibe é comum em muitos pacientes. Este é um fenômeno complexo e os mecanismos adaptativos pelos quais ocorre ainda não estão completamente elucidados. Uma das vias chave em resposta à privação de nutrientes e ação de quimioterápicos é a translocação para o núcleo dos fatores de transcrição TFEB e TFE3 (TFEB/3) que potencializam a autofagia e a biogênese lisossomal, sendo recentemente considerados como oncogenes. Nosso laboratório tem mostrado, em diversos modelos celulares, que a sinalização de Ca2+ mediada pelos receptores Two-Pore Channels (TPCs) induz autofagia, porém o seu papel no câncer ainda não foi explorado. A partir desses pressupostos, investigaremos o papel do TFEB/3 utilizando linhagens de HCC moduladas por agonistas/antagonistas seletivos de receptores TPCs, com a objetivo de, em uma primeira parte do projeto, investigar como os mecanismos de transdução de sinal de Ca2+ mediados pelos TPCs na modulação da autofagia via TFEB/3 podem afetar os processos de proliferação, migração, invasão, e quimiossensibilizacão em células HepG2 e HuH-7. Para tanto, serão utilizadas metodologias de proteômica, bioquímica e de biologia molecular para o estudo das vias autofágicas mediadas pelo TFEB/3 e de genes alvo em resposta a diferentes tratamentos que induzem a translocação nuclear desses fatores de transcrição. Os resultados fornecerão novos alvos moleculares que potencialmente desempenham um papel fundamental no tratamento do câncer. (AU)