Estudo da lipofagia mediada pelos receptores two-pore channels

Resumo

As doenças metabólicas relacionadas com a obesidade é uma importante questão de saúde pública em todo o mundo. Os lipídios são componentes essenciais de uma célula pois fornecem substratos energético para diversos processos celulares, são intermediários de sinalizações e baseiam a formação de membranas biológicas. Os lisossomos desempenham um papel importante no processo de reciclagem celular por meio do recrutamento de lipídios para os lisossomos via autofagia com posterior degradação desses lipases lisossômicas. Esse processo, chamado de lipofagia, pode ser controlado por meio do fator de transcrição EB (TFEB), regulador mestre da autofagia, o qual pode ser funcionalmente ativado pela liberação de Ca2+ lisossomal em resposta a alguma alteração do metabolismo. O ácido nicotínico adenina dinucleotídeo fosfato (NAADP) foi postulado como sendo um importante segundo mensageiro celular ativando receptores Two-Pore Channels (isoformas TPC1 e TPC2) localizados no sistema endolisossomal. A ativação dos TPCs pelo NAADP causa a liberação de Ca2+ contido nos lisossomos, induzindo a autofagia e regulando o tráfico vesicular. Neste projeto, objetiva-se compreender a via mediada pelo lisossomo controlada pela sinalização do NAADP no contexto da lipofagia, e, assim, fornecer novas evidências de como a lipotoxicidade pode ser regulada. Experimentos para avaliar as vias relacionadas ao fluxo autofágico, à sinalização TFEB e ao metabolismo serão realizados em adipócitos oriundos de tecido adiposo marrom na presença ou ausência de NAADP, superexpressando ou silenciando genes Tpcn. A morfologia e funcionalidade dos autofagossomos e lisossomos serão avaliadas por microscopia confocal e microscopia eletrônica. Este estudo destaca a importância da lipofagia mediada pelos TPCs, contribuindo para o desenvolvimento de novas terapias. (AU)