Novas metodologias analíticas baseadas em espectrometria de massas para o estudo de modificações pós-traducionais de proteínas

Resumo

A glicosilação O-ligada é uma modificação pós-traducional (MPT) de proteínas em grupos funcionais hidroxila dos aminiácidos serina ou treonina. Esta MPT desempenha papéis importantes, incluindo adesão de células de mamíferos, determinantes funcionais para reconhecimento de anticorpos, regulação da estabilidade e atividade de proteínas, direcionamento de glicoproteínas e interação parasita-hospedeiro onde, por exemplo, Trypanosoma cruzi, o agente etiológico da doença de Chagas (American Trypanosomiasis) interage com as células hospedeiras durante o reconhecimento, adesão e infecção. A Doença de Chagas é uma doença tropical negligenciada e endêmica em países da América Latina, e que leva a cardiomiopatia, megaviscera ou complicações neurológicas na fase crônica da doença. Uma melhor compreensão da interação T. cruzi-hospedeiro ajudará a priorizar novos alvos terapêuticos. Apesar da importância da glicosilação O-ligada, as estratégias de desenvolvimento de métodos para esta MPT ficaram em segundo plano. No estudo proposto, buscaremos desenvolver métodos analíticos para o estudo das glicoproteínas O-ligadas. O desenvolvimento de novos métodos analíticos para análise de MPTs oferecerá a possibilidade de detectar modificações de proteínas em sistemas biológicos complexos com alta precisão e sensibilidade, ampliando nosso conhecimento atual. Em particular, a identificação da glicosilação de proteínas em diferentes estágios de vida do T. cruzi, pertencentes a diferentes subdivisões genéticas (TcII e TcVI), e células hospedeiras será avaliada e associada à expressão de glicosiltransferases específicas. O glicoma e o glicoproteoma em larga escala da superfície celular combinados com ensaios funcionais serão utilizados como determinantes moleculares, ligando a expressão da enzima de glicosilação ao fenótipo. Os inibidores da glicosilação de proteínas serão avaliados como potenciais alvos quimioterápicos do T. cruzi.