Síntese, estudos e aplicações de sondas fluorescentes e circular dicroicas para caracterização de interações com proteínas, DNA e determinação de atividade enzimática

• Processo: 19/18445-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2023
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Valdecir Farias Ximenes
• Beneficiário: Valdecir Farias Ximenes
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências (FC). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Bauru. Bauru , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Aguinaldo Robinson de Souza ; Nelson Henrique Morgon
• Assunto(s): Biofísica Espectroscopia Peroxidases DNA Albuminas Dicroísmo circular Corantes fluorescentes Amiloide Proteínas Atividade enzimática
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: agregados amiloides | albumina | dicroismo circular | Dna | peroxidases | sondas fluorescentes | espectroscopia, biofisica

Resumo

Na detecção, monitoração e quantificação de processos moleculares em meios simples e complexos busca-se o contraste entre aquilo que se quer e o que não se quer ver, ou seja, o aumento da razão sinal/ruído. Neste panorama, técnicas baseadas em fluorescência se destacam, pois são os métodos mais utilizados quando se trata de estudos no campo químico e biomédico. Seria impossível imaginar o desenvolvimento em áreas como bioquímica, imunologia, biologia celular e molecular, sem o uso de marcadores fluorescentes capazes de elucidar o envolvimento de proteínas, metabólitos, espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, liberação ou captação de íons, alterações de pH intracelular, potencial de membrana, vias de sinalização etc. Este projeto enquadra-se neste campo, pois parte do mesmo está voltado ao desenvolvimento e aplicação de sondas fluorescentes com os seguintes propósitos: síntese e estudo de amino-quinolinas fluorescentes para determinação seletiva de atividade enzimática das enzimas mieloperoxidase e peroxidase de eosinófilos; síntese e estudo de sonda fluorescente para estudo de DNA via formação de exciplexo; estudo de transferência de energia (FRET) para elucidação de interação de sondas fluorescentes com albumina; estudos solvatocrômicos com as sonda 4-(dicianodometileno)-2-metil-6-(4-dimetilaminostiril)-4H-pirano e 4-dimetilamino-²-nitroestireno e aplicação para determinação de constante dielétrica no interior de proteína e detecção de agregados amiloides. O projeto visa também a síntese (sistemas bifenílicos) e desenvolvimento de sondas susceptíveis à indução de sinal de dicroísmo circular. Neste caso temos como meta desenvolver um método para monitorar o deslocamento das sondas entre duas proteínas em função do tempo e aplicar ao estudo de caracterização de agregados amilóides. Ainda nesta linha, o sinal de dicroísmo circular induzido ao corante rosa bengala será utilizado para estudar sua movimentação na proteína. Todos os estudos citados acima terão a sua contraparte teórica por métodos ab initio, onde se buscará a compreensão dos fenômenos a nível molecular, simulações dos espectros de absorção, emissão e de dicroísmo circular das sondas livres e complexadas às macromoléculas. (AU)

Publicações científicas

(18)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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