Bases moleculares da infecção pelo Trypanosoma cruzi: análise dos mecanismos envolvidos e comparação das duas linhagens filogenéticas distintas do parasita

• Processo: 02/13705-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2003
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2007
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Nobuko Yoshida
• Beneficiário: Nobuko Yoshida
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores principais: José Franco da Silveira Filho ; Maurício Martins Rodrigues ; Renato Arruda Mortara
• Auxílio(s) vinculado(s): 07/50356-5 - Phileno pinge filho | Univ estadual londrina/uel - Brasil, AV.BR
• Bolsa(s) vinculada(s): 06/61701-2 - Caracterização das formas metacíclicas de Trypanosoma cruzi híbrido quanto à invasão celular e moléculas de superfície e/ou secretadas, BP.IC; 07/50386-1 - Trypanosoma dionisi: estudo dos mecanismos de invasao celular no contexto da infeccao isolada e da co-infeccao com trypanosoma cruzi ou escherichia coli enteroinvasiva., BP.IC; 06/50058-1 - Rearranjos cromossômicos em Trypanosoma cruzi: identificação dos sítios de quebra e mecanismos moleculares envolvidos, BP.DD; + mais bolsas vinculadas 04/15299-2 - Estudos sobre a estrutura e organização das extremidades cromossomi CAs de Trypanosoma cruzi com ferramentas de bioinformática, cromossomo artificial e radiação ionizante, BP.DD; 04/10824-1 - Mecanismos de invasão e tráfego intracelular de formas amastigotas extracelulares das duas principais linhagens filogenéticas do Trypanosoma cruzi: papel da bactéria intracelular Coxiella burnetii, BP.DD; 04/07172-2 - Caracterização de mucinase de Trypanosoma cruzi: estrutura, propriedades e função na infecção oral por formas metacíclicas, BP.PD; 03/12962-0 - Estudos da invasão de células em cultura por formas amastigotas extracelulares de cepas de Trypanosoma Cruzi isoladas de pacientes chagásicos, BP.DR; 03/13478-4 - Vias de sinalizacao no trypanosoma cruzi. estudo das fosfatidilinositol 3-quinases nas formas metaciclicas do parasita., BP.PD; 03/09675-9 - Análise do impacto na resposta imune do polimorfismo da proteína 2 da superfície de amastigotas (ASP-2) expressa em diferentes cepas das linhagens filogeneticamente 1 e 2 de Trypanosoma cruzi, BP.DD; 03/10434-6 - Estudo dos mecanismos de invasão celular pelas formas metacíclicas do Trypanossoma cruzi, BP.DD; 03/13885-9 - Estrutura e organizacao dos cromossomos de trypanosoma cruzi: rearranjos cromossomicos em cepas e clones do parasita., BP.IC; 03/12306-5 - Identificacao de ests("expressed sequence tags") de tripomastigotas metaciclicos de trypanosoma cruzi., BP.IC - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Trypanosoma cruzi Doença de Chagas Infecções por protozoários
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Desenvolvimento Intracelular | Infeccao In Vivo | Invasao Celular | Moleculas De Superficie | Trypanosoma Cruzi

Resumo

O Trypanosoma cruzi, o agente causal da doença de Chagas, é um organismo de grande interesse do ponto de vista biológico. Embora a transmissão da doença esteja controlada nos países do Cone Sul, o T. cruzi continua a ser transmitido em muitos países da América Latina e a infecção por este parasita, que afeta 15-16 milhões de pessoas, constitui ainda um sério problema de saúde pública. Decorridos mais de 90 anos desde a sua descoberta, a infecção por T. cruzi ainda não é muito bem conhecida em diversos aspectos. Neste projeto temático pretendemos estudar, num contexto amplo e abrangente, o processo de infecção pelo T. cruzi, um verdadeiro complexo que inclui cepas filo geneticamente distintas. Para entender este complexo, faremos a análise comparativa de cepas e clones do parasita pertencentes aos dois grandes grupos filogenéticos (T. cruzi I e T. cruzi II), cuja diversidade tem sido revelada por nossos achados e observações de outros grupos de pesquisa. As informações geradas no nosso e em outros laboratórios apontam a importância de se analisar a infecção por T. cruzi dentro dessa perspectiva. Vamos prosseguir o nosso trabalho com vistas à elucidação, em nível molecular, dos mecanismos de invasão celular, escape do vacúolo parasitóforo, desenvolvimento intracelular e persistência do T. cruzi no hospedeiro mamífero. Um exemplo de diversidade entre T. cruzi I e T. cruzi II é a capacidade de invadir células de mamífero in vitro, que está associada com a expressão diferenciada de glicoproteínas na superfície do parasita e com a ativação de diferentes vias de transdução de sinal dentro do parasita. Soma-se ainda a essa diversidade, entre muitas outras, a questão das diferentes formas do parasita, que infectam a célula hospedeira por mecanismos distintos. Tripomastigotas metacíclicos, amastigotas e tripomastigotas sanguíneos expressam na superfície moléculas estágio-específicas, que lhes conferem propriedades para interações celulares diferenciadas. A presente iniciativa irá contemplar todas essas questões através de experimentos com as diversas formas infectantes do T. cruzi. Iremos além, vamos incluir ensaios in vivo e ex-vivo. O papel das diferentes moléculas do parasita na infecção em camundongos será analisado. A relação função-estrutura das diferentes moléculas, definida apenas para algumas delas, será analisada pelo seqüenciamento dos respectivos genes clonados, geração de proteínas recombinantes para ensaios biológicos, além da produção de anticorpos para diversas finalidades. Diferentes técnicas serão empregadas para a determinação estrutural das moléculas purificadas do parasita. Farão parte também do projeto os estudos sobre estrutura, organização e expressão de genes que codificam moléculas de superficie do T. cruzi implicadas no processo de infecção. Estes estudos poderão trazer novas informações sobre os mecanismos de controle da expressão dos diversos genes e sobre a evolução das famílias multigênicas. Contamos com uma equipe que vem trabalhando há vários anos, de maneira bastante produtiva, em programas de pesquisa conjuntos. Com o nosso grupo, que inclui pesquisadores com larga experiência em Biologia Molecular, Biologia Celular, Imunologia, Microscopia Confocal e Eletrônica, e com a colaboração de pesquisadores no Brasil e no exterior, pretendemos viabilizar o projeto proposto. (AU)