| Processo: | 07/07476-0 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de julho de 2008 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2010 |
| Área do conhecimento: | Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos |
| Pesquisador responsável: | Regina Maria Barretto Cicarelli |
| Beneficiário: | Regina Maria Barretto Cicarelli |
| Instituição Sede: | Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil |
| Município da Instituição Sede: | Araraquara |
| Bolsa(s) vinculada(s): | 08/07761-9 - Caracterização molecular e funcional de proteínas que compõem o complexo spliceosomal em tripanosomatídeos, BP.TT |
| Assunto(s): | Trypanosoma brucei brucei Trypanosoma cruzi RNA mensageiro Ribonucleoproteínas nucleares pequenas RNA nuclear pequeno Spliceossomos Trans-splicing |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | snRNA | snRNP | spliceossomo | trans-splicing | Trypanasoma brucei | Trypanosoma cruzi | Biologia Molecular |
Resumo
Em tripanosomatideos, o processo de trans-splicing é responsável pelo processamento dos pré-mRNAs policistronicos, resultando na individualização de cada gene, de modo que cada mRNA contenha a seqüência spliced leader (SL) na extremidade 5. Esse processo requer a participação das ribonucleoproteínas (snRNPs) U2, U4/U6, U5 e SL RNP, que são constituídas por snRNAs, 7 proteínas Sm (comuns a todos) e proteínas especificas de cada partícula. Através da produção in vivo e purificação da proteína SmD1-PTP tagged, foi possível a identificação de 41 proteínas que interagem com essa partícula, das quais 16 foram anotadas como proteínas conservadas hipotéticas. Dentre essas, já foi possível a identificação de um homólogo de proteína especifica U1-A, uma proteína Lsm, uma proteína U5 especifica e duas proteínas que não se ligam diretamente a esses snRNAs, mas que provavelmente participam do mecanismo como fatores de splicing. Sendo assim, este projeto propõe a caracterização molecular e funcional das outras 11 proteínas conservadas hipotéticas com o intuito de identificar novos possíveis pontos de ataque quimioterápico parasita-específico. Para isso serão utilizadas técnicas de PTP-tag, primer extension para a análise de ligação aos snRNAs, RNAi para a verificação da essencialidade para a sobrevivência do parasita e funcionalidade na reação de trans-splicing. Os dados obtidos serão importantes em futuros experimentos de avaliação de mecanismo de ação de substâncias tripanocidas na reação de trans-splicing em tripanosomas. (AU)
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