Subprojeto 1: tranportador ABC e resistência a benznidazol em Trypanosoma cruzi. Subprojeto 2: produção do fitormônio ácido indolil acético (AIA) em Phytomonas serpens

• Processo: 10/50957-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Bianca Silvana Zingales
• Beneficiário: Bianca Silvana Zingales
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 10/12464-3 - Clonagem do gene TcABCG1 de cepas Trypanosoma cruzi e análise de SNPS (Singles Nucleotide Polymorphisms), BP.TT
• Assunto(s): Doença de Chagas Trypanosoma cruzi Transportadores de cassetes de ligação de ATP Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acido Indolil Acetico | Benznidazol | Doenca De Chagas | Indolpiruvato Descarboxilase | Phytomonas Serpens | Trypanosoma Cruzi

Resumo

Este projeto é constituído por dois subprojetos que representam a continuidade de estudos financiados pela FAPESP. No subprojeto 1 pretendemos investigar o envolvimento de um transportador ABC na resistência natural de isolados de Trypanosoma cruzi a benznidazol (BZ), um dos dois compostos utilizados no tratamento da doença de Chagas. Diferenças geográficas no sucesso terapêutico foram atribuídas a diferenças de suscetibilidade a BZ das cepas infectantes. Evidências obtidas por nosso grupo, utilizando microarranjos de DNA e RT-PCR em tempo real, sugerem que um transportador ABC de T. cruzi, pertencente à subfamília G, TcABCG1, esteja envolvido no processo. São objetivos do subprojeto: (i) clonar e sequenciar o gene TcABCG1 de cepas sensíveis e resistentes a BZ, visando verificar a possível presença de SNPs e determinar seu número de cópias no genoma das cepas; (ii) analisar a ação de inibidores de transportadores ABC na redução da resistência a BZ; (iii) verificar se a superexpressão do gene TcABCG1 aumenta a resistência a BZ e nifurtimox. O subprojeto 2 tem por objetivo comprovar a produção do fitormônio ácido indolil acético (AIA) em Phytomonas serpens e investigar sua funcionalidade. Neste fitoprotozoário caracterizamos um gene que apresenta elevada similaridade com indolpiruvato descarboxilases (IPDCs) bacterianas e com putativas piruvato/IPDCs de Leishmania. Este gene não apresenta ortólogos em T. cruzi e T. brucei. A IPDC está na via de biossíntese de AIA, um dos hormônios vegetais mais importantes. Além da caracterização da presença de AIA e seus intermediários em meio de cultura condicionado de P. serpens e L. major, determinaremos alguns parâmetros cinéticos da reação enzimática nos dois organismos e na proteína recombinante TcABCG1, visando verificar a possibilidade de que a enzima seja bifuncional com atividade de piruvato descarboxilase e indolpiruvato descarboxilase. Finalmente, pretendemos investigar a funcionalidade do fitormônio produzido por P. serpens em experimentos clássicos de fisiologia vegetal. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

IENNE, SUSAN; FRESCHI, LUCIANO; VIDOTTO, VANESSA F.; DE SOUZA, TIAGO A.; PURGATTO, EDUARDO; ZINGALES, BIANCA. Auxin production by the plant trypanosomatid Phytomonas serpens and auxin homoeostasis in infected tomato fruits. Parasitology, v. 141, n. 10, p. 1299-1310, SEP 2014. (08/50209-5, 10/50957-1)