Producao de oxido nitrico por neutrofilos das vias aereas na fase inicial da asma murina.

• Processo: 06/05462-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2007
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia
• Pesquisador responsável: Sônia Jancar
• Beneficiário: Sônia Jancar
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Asma Óxido nítrico Inflamação Neutrófilos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Asma | Neutrofilos | Oxido Nitrico | Inflamação

Resumo

Em modelos experimentais de asma, óxido nítrico (NO) é produzido e contribui para a fisiopatologia da doença. Neutrófilo é a primeira célula que infiltra no pulmão em resposta ao estímulo antigênico, ela tem a capacidade para produzir NO, mas não existe uma demonstração clara que os neutrophils contribuem para a produção de NO na asma. Este foi o objetivo do presente estudo. Em intervalos semanais camundongos C57Bl/6 foram sensibilizados duas vezes com ovalbumina em hidróxido de alumínio e desafiados duas vezes com aerossol de ovalbumina. O pico de infiltração de neutrófilos no fluido de lavado broncoalveolar (BALF) ocorreu 12h após o desafio, quando neutrófilos constituíram 70% da população de células e eosinófilos só 1.5%. Preparações de células do BALF foram marcadas com fluorescência sensível a NO (DAF-2) e com um marcador de núcleo (DAPI). A maioria da marcação com DAF-2 poderiam ser identificadas como leucócitos polimorfonucleares, pela co-localização de marcação com DAF-2 e DAPI. Células de animais tratados com L-NAME, não estavam marcadas para DAF-2 que confirma a especificidade de DAF-2 na marcação de NO. Além disso, a expressão do pico de óxido nítrico sintase induzível (NOS2), em células do BALF e homogenatos de pulmão, foi coincidente com o pico de neutrófilos no BALF. Expressão de proteína NOS2 (unidades arbitrárias) foi descoberta 6h após o desafio (17.8±9.1 em células de BALF; 47.5±7.7 em homogenato pulmonar), o pico de expressão ocorreu 12h após o desafio (54.5±8.7 e 133.7±10), diminuindo depois disso e já não sendo detectado após 24h. Assim, neutrófilos que infiltram o pulmão na fase inicial da asma murina estão produzindo NO via NOS2. (AU)