| Processo: | 12/51580-4 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de maio de 2013 |
| Data de Término da vigência: | 31 de julho de 2015 |
| Área do conhecimento: | Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade |
| Pesquisador responsável: | Anete Pereira de Souza |
| Beneficiário: | Anete Pereira de Souza |
| Instituição Sede: | Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil |
| Município da Instituição Sede: | Campinas |
| Assunto(s): | Doenças de plantas Clorose variegada dos citros Citricultura Xylella fastidiosa Expressão gênica Genomas Regulação da expressão gênica |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Citrus | Cvc | Expressao Proteica | Fitopatogenicidade | Xylella Fastidiosa |
Resumo
Com o sequenciamento do genoma da bactéria Xylella fastidiosa linhagem 9a5c, houve um grande aumento de informações relacionadas à sua fisiologia e patogenia, porém muitas das proteínas identificadas na análise de seu genoma ainda não apresentam funções preditas, sendo classificadas como proteína hipotética ou de função desconhecida. Desta forma, este projeto visa avaliar as funções biológicas das proteínas identificadas em projetos de sequenciamento para a elucidação dos processos de patogenicidade. Sendo assim, este trabalho tem como objetivo caracterizar funcionalmente sete proteínas denominadas: ycjZ (ORF Xf1480), operon do sistema toxina-antitoxina (Xf2162 e Xf2163), TolC (ORF Xf2255), VirJ (ORF Xf0617 e Xf 2329) e a VapD (ORF Xfb0051). A primeira apresenta alta similaridade com membros da família de reguladores transcricionais do tipo LysR (LTTR), que participam na regulação de genes envolvidos na divisão celular, no quorum sense, na formação de biofilme, na virulência e na resposta ao estresse oxidativo. As outras seis proteínas estão inseridas em processos metabólicos diferentes, mas não menos importantes, tais como, formação de bomba de efluxo (TolC), sistema de secreção de macromoléculas tipo IV e transferência horizontal de DNA (AcvB) e proteínas que respondem a variações de temperatura (VapD). A caracterização funcional compreenderá a produção de anticorpos para cada proteína alvo, seguida de imunodetecção durante as diferentes fases de formação do biofilme de X. fastidiosa. Além disso, a expressão das proteínas também será quantificada utilizando a técnica de qRT-PCR, utilizando plantas de laranjas infectadas que apresentam clorose, enquanto a caracterização estrutural será compreendida por ensaios de Dicroísmo Circular (CD), e Cromatografia de Exclusão por Peso Molecular. (AU)
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