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Otimização e Aumento de Escala de Processos com Líquidos Iônicos como nova ferramenta de Purificação da Proteína Verde Fluorescente Recombinante produzida por Escherichia coli "GFPurIL"

Processo:14/19793-3
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2015
Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2019
Área do conhecimento:Engenharias - Engenharia Química - Tecnologia Química
Acordo de Cooperação: Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT)
Pesquisador responsável:Sandro Roberto Valentini
Beneficiário:Sandro Roberto Valentini
Pesquisador Responsável no exterior:João Manuel da Costa e Araújo Pereira Coutinho
Instituição Parceira no exterior: Universidade de Aveiro (UA) , Portugal
Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Município da Instituição Sede:Araraquara
Pesquisadores associados:Adalberto Pessoa Junior ; Jorge Pereira ; Mara Guadalupe Freire Martins ; Sónia Patrícia Marques Ventura ; Valéria de Carvalho Santos Ebinuma
Assunto(s):Extração líquido-líquido  Líquidos iônicos  Biomarcadores  Proteínas de fluorescência verde  Purificação de proteínas  Escherichia coli 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Aqueous Two-Phase Systems | Biomarker Proteins | Green Fluorescent Protein | ionic liquids | Liquid-liquid Extraction | Purification | Engenharia de Bioprocessos

Resumo

As indústrias Farmacêutica e Biotecnológica têm como novos desafios a utilização de proteínas como terapêuticas inovadoras e vitais para o tratamento de doenças bastante complexas. Contudo, o controlo da sua produção e/ou identificação de sua aplicabilidade e eficácia requer um desenvolvimento de novas biomarcadores e bionsensores. Desse modo, a facilidade deteção da Proteína Verde Fluorescente (GFP) levou a que a mesma se tenha tornado um dos biomarcadores biológicos mais promissores. Contudo, tal como as outras proteínas/enzimas produzidas por microorganismos, a sua produção e purificação é bastante complexa e extremamente dispendiosa, o que limita uma larga utilização da GFP. Assim, este projeto propõe como metodologia alternativa e mais sustentável o uso de Sistemas de Duas Fases Aquosas com Líquidos Iônicos (IL-ATPS) na purificação e isolamento da GFP recombinante produzida por Escherichia coli. De forma a atingir este objectivo, este projeto irá começar com a expressão e produção da GFP, e posteriormente a optimização da sua purificação a partir dos meios fermentados utilizando quatro abordagens diferentes de IL-ATPS. Então, será realizado o respetivo aumento de escala dos sistemas de purificação optimizados em escala laboratorial para uma escala piloto. Sumariando, com este projeto pretende-se desenvolver e estudar a aplicabilidade industrial de uma nova tecnologia de downstream para a produção de GFP, a qual poderá ser depois aplicada para outras proteínas e bioprodutos de valor acrescentado. (AU)

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Publicações científicas (20)
(As publicações científicas contidas nesta página são originárias da Web of Science ou da SciELO, cujos autores mencionaram números dos processos FAPESP concedidos a Pesquisadores Responsáveis e Beneficiários, sejam ou não autores das publicações. Sua coleta é automática e realizada diretamente naquelas bases bibliométricas)
DOS SANTOS, NATHALIA VIEIRA; SANTOS-EBINUMA, VALERIA DE CARVALHO; PESSOA JUNIOR, ADALBERTO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. Liquid-liquid extraction of biopharmaceuticals from fermented broth: trends and future prospects. JOURNAL OF CHEMICAL TECHNOLOGY AND BIOTECHNOLOGY, v. 93, n. 7, SI, p. 1845-1863, . (14/16424-7, 14/01580-3, 14/19793-3, 13/08617-7, 16/07529-5)
MUSSAGY, CASSAMO U.; PEREIRA, JORGE F. B.; DUFOSSE, LAURENT; RAGHAVAN, VIJAYA; SANTOS-EBINUMA, VALERIA C.; PESSOA JR, ADALBERTO. . CRITICAL REVIEWS IN FOOD SCIENCE AND NUTRITION, . (17/50303-0, 15/50058-0, 14/19793-3, 14/16424-7, 18/06908-8, 20/08655-0)
MUSSAGY, CASSAMO USSEMANE; CARIZIA GUIMARAES, ANA ALICE; FERREIRA ROCHA, LARA VICENTE; WINTERBURN, JAMES; SANTOS-EBINUMA, VALERIA DE CARVALHO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. . Biochemical Engineering Journal, v. 165, . (17/50303-0, 14/16424-7, 14/01580-3, 14/19793-3, 19/09618-3)
DOS SANTOS, NATHALIA VIEIRA; SAPONI, CAROLINA FALASCHI; RYAN, TIMOTHY M.; PRIMO, FERNANDO L.; GREAVES, TAMAR L.; PEREIRA, JORGE F. B.. . International Journal of Biological Macromolecules, v. 164, p. 3474-3484, . (18/20833-0, 14/16424-7, 14/19793-3, 18/06576-5, 16/07529-5, 18/50009-8, 18/01858-2)
LOPES, CAMILA; DOS SANTOS, NATHALIA VIEIRA; DUPONT, JANA; PEDROLLI, DANIELLE BISCARO; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; SANTOS-EBINUMA, VALERIA DE CARVALHO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. . Biotechnology and Applied Biochemistry, v. 66, n. 4, p. 527-536, . (14/16424-7, 18/50009-8, 14/19793-3, 16/07529-5)
MUSSAGY, CASSAMO USSEMANE; WINTERBURN, JAMES; SANTOS-EBINUMA, VALERIA CARVALHO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. . Applied Microbiology and Biotechnology, v. 103, n. 3, p. 1095-1114, . (17/50303-0, 14/16424-7, 14/01580-3, 14/19793-3)
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TORRES-ACOSTA, MARIO A.; DOS SANTOS, V, NATHALIA; VENTURA, SONIA P. M.; COUTINHO, JOAO A. P.; RITO-PALOMARES, MARCO; PEREIRA, JORGE F. B.. . Separation and Purification Technology, v. 254, . (14/16424-7, 14/19793-3, 16/07529-5)
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DOS SANTOS, NATHALIA VIEIRA; SAPONI, CAROLINA FALASCHI; GREAVES, TAMAR LOUISE; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. . RSC ADVANCES, v. 9, n. 40, p. 22853-22858, . (14/16424-7, 18/50009-8, 18/06576-5, 18/01858-2, 14/19793-3, 16/07529-5)
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VERISSIMO, NATHALIA VIEIRA; SAPONI, CAROLINA FALASCHI; RYAN, TIMOTHY M.; DE SOUZA OLIVEIRA, RICARDO PINHEIRO; GREAVES, TAMAR L.; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. . BIOPHYSICAL REVIEWS, v. 13, n. 6, p. 1-pg., . (16/07529-5, 18/01858-2, 18/06576-5, 14/19793-3, 18/50009-8, 20/14144-8, 14/16424-7, 18/20833-0, 18/25511-1)
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EGUILUZ, ALEXANDRA DANIELA BARRIOS; ORLANDI, CAROLINE BARCELOS COSTA; SANTO, RAFAEL DIAS DO ESPIRITO; ZAMPIERI, EDUARDO HENRIQUE; DOS ANJOS, LUANA RIBEIRO; GIANNINI, MARIA JOSE SOARES MENDES; FUSCO-ALMEIDA, ANA MARISA; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; ZANELLI, CLESLEI FERNANDO; DE SOUZA-MOREIRA, TATIANA MARIA; et al. . Brazilian Journal of Microbiology, v. N/A, p. 11-pg., . (17/18388-6, 16/16970-7, 14/19793-3)
RODRIGUES TEIXEIRA-PINTO, RENATA GARCIA; MOLINO, JOAO VITOR DUTRA; SANTOS-EBINUMA, VALERIA CARVALHO; PESSOA, JR., ADALBERTO; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO; LOPES, ANDRE MORENI. . Separation and Purification Technology, v. 210, p. 69-79, . (07/51978-0, 14/19793-3, 05/60159-7)
DOS SANTOS, NATHALIA V.; MARTINS, MARGARIDA; SANTOS-EBINUMA, VALERIA C.; VENTURA, SONIA P. M.; COUTINHO, JOAO A. P.; VALENTINI, SANDRO R.; PEREIRA, JORGE F. B.. . ACS SUSTAINABLE CHEMISTRY & ENGINEERING, v. 6, n. 7, p. 9383-9393, . (14/16424-7, 14/19793-3, 16/07529-5)
LOPES, ANDRE MORENI; DUTRA MOLINO, JOAO VITOR; DOS SANTOS-EBINUMA, VALERIA CARVALHO; PESSOA, JR., ADALBERTO; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. . Separation and Purification Technology, v. 206, p. 39-49, . (05/60159-7, 14/16424-7, 14/19793-3, 07/51978-0)
NEVES, CATARINA M. S. S.; SHAHRIARI, SHAHLA; LEMUS, JESUS; PEREIRA, JORGE F. B.; FREIRE, MARA G.; COUTINHO, JOAO A. P.. . Physical Chemistry Chemical Physics, v. 18, n. 30, p. 20571-20582, . (14/19793-3, 14/16424-7)
MUSSAGY, CASSAMO U.; TABANEZ, NAIARA L.; FARIAS, FABIANE O.; KURNIA, KIKI A.; MAFRA, MARCOS R.; PEREIRA, JORGE F. B.. . Chemical Physics Letters, v. 754, . (15/50058-0, 14/16424-7, 14/19793-3)
DOS SANTOS, NATHALIA VIEIRA; SANTOS-EBINUMA, VALERIA DE CARVALHO; PESSOA JUNIOR, ADALBERTO; BRANDAO PEREIRA, JORGE FERNANDO. . JOURNAL OF CHEMICAL TECHNOLOGY AND BIOTECHNOLOGY, v. 93, n. 7, p. 19-pg., . (14/16424-7, 14/01580-3, 16/07529-5, 13/08617-7, 14/19793-3)