| Processo: | 15/18039-6 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de maio de 2016 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2018 |
| Área do conhecimento: | Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica |
| Pesquisador responsável: | Carmen Silvia Passos Lima |
| Beneficiário: | Carmen Silvia Passos Lima |
| Instituição Sede: | Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil |
| Município da Instituição Sede: | Campinas |
| Pesquisadores associados: | Albina Messias de Almeida Milani Altemani ; Gustavo Jacob Lourenço ; Manoela Marques Ortega |
| Assunto(s): | Oncologia Polimorfismo gênico |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Carcinoma de orofaringe | Erp29 | Kif13B | Polimorfismo gênico | Xpc | Cancerologia |
Resumo
As diferenças individuais geradas por polimorfismos de base única (SNPs) em genes de reparo de danos ao DNA, em mecanismos de processamento e transporte de proteínas e em mecanismos de transporte intracelular indicam que a constituição genética pode predispor indivíduos ao carcinoma de células escamosas (CCE) de orofaringe (OF) e influenciar no prognóstico de pacientes portadores do tumor. Os papéis desempenhados pelos SNPs XPC c.2815A>C, ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A no CCEOF são desconhecidos. Frente ao exposto, os objetivos do presente estudo são: 1) verificar se os genótipos dos SNPs XPC c.2815A>C, ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A influenciam o risco de ocorrência do CCEOF, os aspectos clínicos dos pacientes com CCEOF e as características do tumor; 2) verificar se os genótipos dos SNPs XPC c.2815A>C, ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A influenciam a expressão do gene em células tumorais, 3) verificar se os genótipos dos SNPs XPC c.2815A>C, ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A influenciam na capacidade de reparo de DNA, ciclo celular e apoptose em células tumorais; e 4) verificar se os distintos genotipos dos SNPs ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A alteram a expressao dos miRNAs miR-4421 e let-7e-3p, respectivamente. O DNA genômico do sangue periférico de 250 pacientes com CCEOF e 250 controles será analisado para identificar os genótipos do SNP com a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real com o ensaio TaqMan® (Applied Biosystems®). A linhagem celular de CCE de faringe humano (FaDu) será modificada geneticamente para apresentar o genótipo homozigoto selvagem ou o genótipo homozigoto variante dos SNPs XPC c.2815A>C, ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A. RNA total e proteína total serão obtidos de sangue periférico de controles, de células tumorais de pacientes (dez com o genótipo homozigoto selvagem, dez heterozigotos e dez homozigotos variantes dos SNPs XPC c.2815A>C, ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A) e da linhagem celular FaDu modificada (genótipo homozigoto selvagem ou genótipo homozigoto variante dos SNPs XPC c.2815A>C, ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A). A expressão gênica será analisada nas amostras por meio da PCR quantitativa com iniciadores específicos e o corante SYBR Green (Applied Biosystems®). A quantificação da proteína nas amostras será realizada pelo método de western blotting e imunohistoquímica. Reparo de DNA, ciclo celular e apoptose serão avaliados por meio do ensaio cometa e por citometria de fluxo em linhagem celular FaDu modificada (genótipo homozigoto selvagem ou genótipo homozigoto variante dos SNPs XPC c.2815A>C, ERP29 c.*293A>G e KIF13B c.*3163G>A. As diferenças entre os grupos serão avaliadas por testes estatísticos específicos. Acreditamos que nossos resultados contribuirão para definir a função dos SNPs em CCEOF. (AU)
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