Clonagem, expressão heteróloga e caracterização do gene LmjF24.0320 que codifica a enzima fumarato hidratase em Leishmania major

• Processo: 06/05538-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Cristina Nonato
• Beneficiário: Patrícia Rosa Feliciano
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas Fumarato hidratase Leishmania major
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cinética Enzimática | clonagem | expressão heteróloga | fumarase | Proteínas

Resumo

O presente projeto visa a clonagem, expressão, purificação e caracterização cinética da enzima citosólica fumarato hidratase (fumarase) de Leishmania major (LmFHc), um protozoário parasita flagelado responsável pela Leishmaniose que afeta 88 países, distribuídos em 5 continentes, e que causa um risco a aproximadamente 350 milhões de pessoas. As fumarases são enzimas que catalisam a hidratação reversível da molécula de fumarato em S-malato. A análise comparativa entre os genomas de tripanosomatídeos indica que Leishmania major expressa a isoforma mitocondrial que atua como parte do ciclo de Krebs e a forma citosólica, que se acredita estar envolvida no metabolismo da molécula de fumarato que é produzida no citosol por diferentes tipos de reações. Estudos recentes em tripanosomatídeos, utilizando Trypanosoma brucei e Trypanosoma cruzi como modelo, sugerem que as enzimas fumarato hidratase são essenciais para sobrevivência destes parasitas. Dentro deste contexto, os estudos aqui propostos, que constituem o primeiro passo para a caracterização bioquímica e cinética da LmFHc poderão fornecer valiosas informações para o desenvolvimento de inibidores específicos, como uma importante ferramenta no combate a Leishmaniose. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FELICIANO, PATRICIA R.; GUPTA, SHREEDHARA; DYSZY, FABIO; DIAS-BARUFFI, MARCELO; COSTA-FILHO, ANTONIO J.; MICHELS, PAUL A. M.; NONATO, M. CRISTINA. Fumarate hydratase isoforms of Leishmania major: Subcellular localization, structural and kinetic properties. International Journal of Biological Macromolecules, v. 51, n. 1-2, p. 25-31, JUL-AUG 2012. (08/08262-6, 06/05538-5, 09/10454-3, 09/15810-2)