Mecanismos e consequências funcionais da interação entre dissulfeto isomerase proteica (PDI) e o complexo NAD(P)H oxidase de células musculares lisas vasculares: papel de tióis redox do motivo tiorredoxina da PDI

• Processo: 07/53171-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Francisco Rafael Martins Laurindo
• Beneficiário: Luciana Pescatore Alves
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 04/13683-0 - Acoplamento do estresse do retículo endoplasmático ao estresse oxidativo em células vasculares via interação entre dissulfeto iomerase protéica e NAD(p)H oxidase: papel de tiol oxidoredutases, AP.TEM
• Assunto(s): Músculo liso vascular Dissulfetos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celula Muscular Lisa Vascular | Dissulfeto Isomerase Proteica | Migracao Ceular | Nad(P)H Oxidase | Tiois Redox

Resumo

Estudos de nosso grupo mostraram que a NADPH oxidase, sofre regulação funcional pela PDI. No entanto, mecanismos celulares e bioquímicos desta interação são desconhecidos. Nossa hipótese é que sítios específicos da PDI envolvendo tióis do motivo tiorredoxina são determinantes da ativação da NAD(P)H oxidase assistida pela PDI. O objetivo geral é investigar por meio de mutações pontuais a importância de sítios de tióis da PDI para a ativação do complexo NAD(P)H oxidase, em VSMC, em diversas situações fisiológicas, envolvendo diferentes isoformas da oxidase, tais como: ação de fatores de crescimento, migração celular, diferenciação celular e resposta integrada ao estresse. Os objetivos específicos são: I) obter e validar mutações sitio dirigidas dos di-tióis do domínio a e a da sequência da PDI humana e transfectar em VSMC; II) analisar o efeito da transfecção da PDI com a mutação do sítio de di-tióis na ativação da oxidase vascular e produção de ROS induzida por agonistas de distintas isoformas da NAD(P)H oxidase: Angiotensina II (Nox1), Tunicamicina (Nox4) e TGFD (Nox 4); III) investigar o efeito das mutações da PDI na co-localização e imunopreciptação entre a PDI e p22phox; IV) avaliar o efeito de mutações da PDI na migração de VSMC (Nox 1) e em alvos da sinalização da UPR (Nox 4). Tais estudos, representam potencial contribuição para melhor entendimento das vias de ativação da oxidase é, da sua integração a outras respostas de estresse celular, proporcionando uma base mais racional para futuras abordagens terapêuticas. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ALVES, Luciana Pescatore. Papel da dissulfeto isomerase proteica (PDI) na migração de células musculares lisas vasculares: possível envolvimento de Nox1 NADPH oxidase e RhoGTPases. 2012. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina (FM/SBD) São Paulo.