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Expressão de pró-colágeno do tipo I, MIP-1alfa e SDF-1alfa por fibroblastos de gengiva e polpa dental humanas estimulados por ácido lipoteicóico de Enterococcus faecalis e lipopolissacarídeo de Escherichia coli e Porphyromonas gingivalis

Processo: 07/00306-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de agosto de 2007
Vigência (Término): 31 de julho de 2011
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia
Pesquisador responsável:Carlos Ferreira dos Santos
Beneficiário:Carla Renata Sipert
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
Assunto(s):Polpa dentária   Gengiva   Quimiocinas   Colágeno

Resumo

A polpa dental é formada de tecido conjuntivo frouxo, sendo constituída por diversas células, dentre as quais os fibroblastos são as mais numerosas. Ao serem submetidas a agressões diversas, estas células respondem com a liberação de substâncias, tais como citocinas e quimiocinas, que participam de maneira ativa no processo inflamatório e com a produção de componentes da matriz extracelular fundamentais para o reparo, como por exemplo, o colágeno. Assim sendo, este projeto tem como objetivos: 1. Avaliar a expressão de pró-colágeno tipo I; 2. Avaliar a expressão de quimiocinas tais como MIP-1alfa e SDF-1alfa por fibroblastos de gengiva e polpa dental humanas estimulados por ácido lipoteicóico (LTA) de E. faecalis e lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli e P. gingivalis; 3. Comparar a liberação destas quimiocinas e do pró-colágeno pelos fibroblastos quando estimulados por LTA ou por LPS e 4. Comparar o comportamento das células provenientes de gengiva e polpa de um mesmo paciente frente aos mesmos estímulos. Serão coletadas polpas de terceiros molares não irrompidos e biópsias de gengiva saudável de um mesmo indivíduo (5 pacientes). Serão picotadas e armazenadas em meio para a cultura de fibroblastos, os quais serão utilizados a partir da quarta passagem. Após adesão das células a placas de 24 poços, o meio de cultura contendo 0,8 - 80 ug/mL de LTA de E. faecalis e 1 - 100 ug/mL de LPS de E. coli ou P. gingivalis será adicionado às placas e depois de 1, 6 e 24 horas, o sobrenadante e as células serão coletados para algumas análises. Para o estudo da expressão de mRNA de pró-colágeno tipo I, MIP-1alfa e SDF-1alfa, será feito PCR em tempo real a partir de RNA total extraído das células em cultura. Para o estudo da expressão protéica de pró-colágeno tipo I, será feito Western blot e para MIP-1alfa e SDF-1alfa, ELISA. A análise estatística será realizada por meio do programa GraphPad Prism 3.0, aplicando-se o teste ANOVA seguido do teste de correção de Bonferroni. Será adotado nível de significância de 5% para que as diferenças sejam consideradas estatisticamente significativas. (AU)

Publicações científicas (6)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SIPERT, CARLA R.; MORANDINI, ANA C.; DIONISIO, THIAGO J.; TRACHTENBERG, ALEXANDER J.; KUO, WINSTON P.; SANTOS, CARLOS F. MicroRNA-146a and microRNA-155 show tissue-dependent expression in dental pulp, gingival and periodontal ligament fibroblasts in vitro. JOURNAL OF ORAL SCIENCE, v. 56, n. 2, p. 157-164, JUN 2014. Citações Web of Science: 11.
SIPERT, CARLA RENATA; MORANDINI, ANA CAROLINA; DIONISIO, THIAGO JOSE; ANDRADE MOREIRA MACHADO, MARIA APARECIDA; PENHA OLIVEIRA, SANDRA HELENA; CAMPANELLI, ANA PAULA; KUO, WINSTON PATRICK; SANTOS, CARLOS FERREIRA. In Vitro Regulation of CCL3 and CXCL12 by Bacterial By-products Is Dependent on Site of Origin of Human Oral Fibroblasts. JOURNAL OF ENDODONTICS, v. 40, n. 1, p. 95-100, JAN 2014. Citações Web of Science: 9.
REZENDE DELGADO, RONAN JACQUES; GASPAROTO, THAIS HELENA; SIPERT, CARLA RENATA; PINHEIRO, CLAUDIA RAMOS; DE MORAES, IVALDO GOMES; GARCIA, ROBERTO BRANDAO; HUNGARO DUARTE, MARCO ANTONIO; BRAMANTE, CLOVIS MONTEIRO; TORRES, SERGIO APARECIDO; GARLET, GUSTAVO POMPERMAIER; CAMPANELLI, ANA PAULA; BERNARDINELI, NORBERTI. Antimicrobial activity of calcium hydroxide and chlorhexidine on intratubular Candida albicans. International Journal of Oral Science, v. 5, n. 1, p. 32-36, MAR 2013. Citações Web of Science: 10.
PATRÍCIA YOSHINO; CELSO KENJI NISHIYAMA; KARIN CRISTINA DA SILVA MODENA; CARLOS FERREIRA SANTOS; CARLA RENATA SIPERT. In Vitro Cytotoxicity of White MTA, MTA Fillapex® and Portland Cement on Human Periodontal Ligament Fibroblasts. Brazilian Dental Journal, v. 24, n. 2, p. 111-116, Abr. 2013.
SIPERT, CARLA RENATA; DE FARIA MORANDINI, ANA CAROLINA; DA SILVA MODENA, KARIN CRISTINA; DIONISIO, THIAGO JOSE; ANDRADE MOREIRA MACHADO, MARIA APARECIDA; PENHA DE OLIVEIRA, SANDRA HELENA; CAMPANELLI, ANA PAULA; SANTOS, CARLOS FERREIRA. CCL3 and CXCL12 production in vitro by dental pulp fibroblasts from permanent and deciduous teeth stimulated by Porphyromonas gingivalis LPS. Journal of Applied Oral Science, v. 21, n. 2, p. 99-105, Abr. 2013. Citações Web of Science: 9.
GASPAROTO, THAIS H.; SIPERT, CARLA R.; DE OLIVEIRA, CARINE E.; PORTO, VINICIUS C.; SANTOS, CARLOS F.; CAMPANELLI, ANA P.; LARA, VANESSA S. Salivary immunity in elderly individuals presented with Candida-related denture stomatitis. GERODONTOLOGY, v. 29, n. 2, p. E331-E339, JUN 2012. Citações Web of Science: 16.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
SIPERT, Carla Renata. Estudo in vitro da produção de quimiocinas e pró-colágeno I por fibroblastos de gengiva, ligamento periodontal e polpa dental humanos. 2011. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Odontologia de Bauru Bauru.

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