Avaliacao de genes envolvidos na via de sinalizacao induzida pela proteina dermicidina no cancer de mama.

• Processo: 07/59800-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: José Ernesto Belizario
• Beneficiário: Dayson Friaça Moreira
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Interferência de RNA Reação em cadeia da polimerase em tempo real Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos Oncogenes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dermicidina | Dna Microarray | Oncogenes | Real Time Pcr | Rnai

Resumo

Em um estudo recente, a expressão e função de DCD foram investigadas usando o método de RNA de interferência (RNAi) em três clones de células de carcinoma de mama MDA-361 RNAi-DCD denominados IBC-I, II, III e clone MDA-361 pKLO (controle). Ensaios in vitro e in vivo mostraram que o silenciamento do gene DCD diminui a resistência celular aos efeitos citotóxicos dos agentes H202, estaurosporina e combinação e TNF e cicloheximida, como também o crescimento dos tumores após a inoculação das células em camundongos NUDE. Em seguida, através da técnica de DNA microarray (Affymetrix gene chip) foi revelado. que apenas 12 genes tiveram suas expressões aumentadas, enquanto aproximadamente 132 genes tiveram suas expressões reduzidas após silenciamento mediado por RNAi. Desta lista, tornaram-se de grande interesse e relevância para os estudos futuros os genes ERBB2 (co-receptor de EGF), TXHF (thioredoxin interacting protein), calcineurina (protein phosphatase 3, calcineurin A), calmodulina (calcium/calmodulin-dependent protein kinase), calreticulin, GDF15 (growth differentiation factor 15), vascular endothelial growtb factor (FGD1) e amphiregulin, ente outros. Em seguida, em análise comparativa dos genes identificados por DNA microarray através da metodologia GEST foi predito que via PIK3/AKT/mTOR pode ser a via preferencial de sinalização da proteína DCD na atividade de proliferação e sobrevivência celular. Também foram feitos estudos que mostraram uma atividade serino-protease da proteína DCD recombinante em ensaios de proteólise do peptídeo Phe-Arg-AMC. Estes dados sugerem que a proteína DCD pode exercer suas funções via interação e clivagem limitada de proteínas ou receptores associados com a proliferação e sobrevivência celular. No presente projeto pretende-se 1) validar os genes regulados pela proteína DCD no câncer de mama por ensaios de PCR quantitativo e western blott, 2) identificar a possível participação da via PIK3/AKT/mTOR na sinalização intracelular induzida pela DCD e 3) identificar substratos naturais e inibidores peptídicos e orgânicos da protease DCD. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BELIZARIO, JOSE E.; SANGIULIANO, BEATRIZ A.; VIANA-SANTOS, BEATRIZ; PEREZ-SOSA, MARCELA; CALDEIRA, IZABELA. Microscopes and technologies for imaging cells and their protein networks: From nano to atomic scale resolution. TECHNOLOGY, v. 5, n. 2, p. 61-73, JUN 2017. (07/59800-5, 12/02497-7, 05/56909-0)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MOREIRA, Dayson Friaça. Avaliação da expressão dos genes envolvidos na via de sinalização induzida pela proteína dermicidina no câncer de mama.. 2012. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.