| Processo: | 10/05503-2 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de agosto de 2010 |
| Data de Término da vigência: | 31 de março de 2014 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas |
| Pesquisador responsável: | Maria Tereza Nunes |
| Beneficiário: | Jamile Calil Silveira |
| Instituição Sede: | Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil |
| Bolsa(s) vinculada(s): | 12/13011-8 - O iodeto regula a expressão e atividade do seu transportador apical pendrina? Estudo em células PCCl3 e TSA-201, BE.EP.DR |
| Assunto(s): | Iodo Glândula tireoide Fisiologia endócrina Expressão gênica Pendrina |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | expressão gênica | iodo | pendrina | Tireóide | Fisiologia Endócrina |
Resumo Pendrina é uma proteína transportadora de ânions, codificada pelo gene PDS. Ela é expressa em vários tecidos, bem como na tiróide, onde está inserida na membrana apical de células foliculares. Estudos demonstraram que a pendrina pode mediar o efluxo apical do iodeto dos tirócitos para o lúmen folicular. Sabendo-se que o iodo é fundamental para a síntese de hormônios tiroidianos e considerando-se que a expressão de alguns mRNAs que codificam proteínas envolvidas com o transporte de oligominerais é modificada por alterações no aporte dos mesmos, é objetivo deste trabalho avaliar, por meio de estudos in vivo e in vitro, o efeito da administração aguda de iodo na expressão do mRNA e proteína pendrina em curtos períodos de tempo (30 min à 24 h), bem como analisar o efeito desse tratamento na atividade da região promotora do gene PDS. Serão utilizados ratos machos Wistar (~200 g), divididos nos grupos: controle e iodo, os quais receberão injeção ip de salina (0,9% NaCl) ou NaI (2 mg de NaI em 0,5 ml de salina), respectivamente, sendo decapitados após 30', 1 e 24 h da administração do iodo/salina. O RNA total da tiróide será extraído para a análise da expressão e grau de poliadenilação do mRNA da Pendrina por Real Time PCR. Para o estudo in vitro será utilizada a linhagem celular de tiróide normal de rato PCCl3, que ao atingir 70% de confluência, será tratada ou não com 10-3 M de NaI. O experimento será realizado em triplicata; as células permanecerão sob tratamento por 30 min, 1 h, e 24 h, e, após esses períodos de tempo, serão removidas e o RNA extraído para análise da expressão do mRNA da Pendrina por Real Time PCR. Para a análise da atividade do promotor de PDS, este será inserido no vetor pGL3-básico, que contém o gene da luciferase, cuja atividade servirá como indicador da atividade deste promotor nas condições de tratamento estudadas. | |
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