Bases moleculares envolvidas na regulacao da expressao do gene do co-transportador de sodio-iodeto (nis) pelo iodeto.

Resumo

O iodo é fundamental para a biossíntese de hormônios tireoidianos. Participa também do controle da função tireoideana, uma vez que regula a expressão de uma série de genes na tireóide, dentre os quais, o que codifica o co-transportador de sódio-iodeto (NIS). No nosso mestrado, demonstramos, tanto in vitro como in vivo, que o excesso de iodo reduz a expressão e o comprimento da cauda poli-A do mRNA da NIS, efeitos que foram identificados a partir de 30 min até 24h de sua administração. Além disso, observamos redução do recrutamento do mRNA de NIS para os políssemos, em células PCC13, indicando um comprometimento da tradução deste transcrito, ou seja da síntese de NIS, frente ao excesso de iodeto. Este projeto tem como objetivo identificar as bases moleculares envolvidas nesses efeitos. Para tal, células PCC13 serão tratadas ou não com NaI (10-3 M) por 30 min ou 12 h, após o que serão realizados ensaios para: (a) análise da estrutura primária do transcrito de NIS, através de seqüenciamento, para identificação de sítios de poliadenilação alternativos que poderiam ser ativados pelo iodeto intracelular; (b) investigação da presença de elementos responsivos ao iodeto no transcrito de NIS, por meio de ensaio de mobilidade eletroforética do RNA (REMSA); (c) análise do papel do citoesqueleto nesses eventos; e (d) análise do conteúdo, localização subcelular e função da NIS frente ao excesso de iodeto, por western blotting, imunocitoquímica e captação de iodeto. A identificação desses mecanismos possibilitará avanços importantes para a compreensão da regulação da expressão do gene da NIS, pelo iodo, abrindo novas frentes de investigação nesse campo. (AU)