| Processo: | 12/12859-3 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Iniciação Científica |
| Data de Início da vigência: | 01 de setembro de 2012 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2013 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada |
| Pesquisador responsável: | André Ricardo de Lima Damasio |
| Beneficiário: | Marcelo Ventura Rubio |
| Instituição Sede: | Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Campinas , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Proteínas recombinantes Expressão de proteínas Xiloglucano Hidrólise enzimática Glicosilação Propriedades funcionais |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Aspergillus clavatus | Aspergillus nidulans A773 | hidrólise | proteína recombinante | xiloglucanase GH12 | xiloglucano | Enzimas Biotecnológicas |
Resumo Grande parte do cenário mundial está atualmente voltado para pesquisas relacionadas a biocombustíveis, formas de redução de CO2 liberado na atmosfera e energias renováveis. Entre estes tópicos, o Brasil se destaca no uso de bioetanol, que além de utilizá-lo para abastecer grande parte dos veículos do país e reduzir a dependência por petróleo, também o exporta. Devido a grande importância deste combustível, vários estudos propondo a produção de mais etanol a partir de resíduos agro-industriais, como o bagaço de cana, são muito interessantes economicamente. A hidrólise enzimática da celulose necessária para produção de etanol de segunda geração passa por várias dificuldades, pois suas fibras estão recobertas por outros tipos de polissacarídeos, sendo necessário o uso de enzimas acessórias, para assim garantir a exposição da celulose. Entre estes polissacarídeos está o xiloglucano, que é intimamente conectado a estas fibras, sendo necessárias xiloglucanases para facilitar o acesso das celulases. Neste estudo serão realizadas a clonagem e expressão de xiloglucanases GH12 do fungo Aspergillus clavatus , utilizando-se outro fungo, Aspergillus nidulans linhagem A773 como sistema de expressão e secreção. Serão selecionados os transformantes com melhor nível de secreção enzimática para prosseguir o estudo, sendo que as enzimas alvo produzidas por estes serão purificadas e caracterizadas. Também será realizado um estudo sobre o efeito da glicosilação destas enzimas, e os resultados que estas imprimem na atividade final frente ao substrato. Aspergillus é especialmente promissor como sistema para expressão de proteínas recombinantes, por possuir toda maquinaria para tradução, enovelamento e modificações pós-traducionais, além de produzir ótimos resultados em relação a quantidade de proteínas secretadas no meio. Assim serão realizados estudos funcionais de xiloglucanases GH12 clonadas, analisando-se o potencial destas enzimas frente a hidrólise de xiloglucano. | |
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