Estudo da imobilização de antígenos de Leishmania infantum sobre plataformas organizadas empregando Ressonância de Plásmons de Superfície e Microbalança de Cristal de Quartzo para detecção a anticorpos específicos de Leishmaniose Visceral

• Processo: 12/24493-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
• Pesquisador responsável: Lauro Tatsuo Kubota
• Beneficiário: Dênio Emanuel Pires Souto
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Leishmania infantum Nanopartículas de ouro Dendrímeros Microbalança de cristal de quartzo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dendrímeros | leishmania infantum | microbalança de cristal de quartzo | Monocamadas auto-organizadas | nanoparticulas de ouro | Ressonância de Plásmons de Superfície | Desenvolvimento de Sistema de Detecção Eletroquímica e Sensores Eletroquímicos

Resumo

Este projeto pretende o desenvolvimento de imunosensores baseados nas técnicas de Ressonância de Plásmons de Superfície (SPR) e Microbalança de Cristal de Quartzo (QCM) para detecção em tempo real de anticorpos anti-Leishmania infantum. Estudos extensivos serão realizados para imobilização de diferentes formas antigênicas de Leishmania infantum, incluindo antígenos brutos, antígenos recombinantes e peptídeos sintéticos sobre a superfície transdutora. Neste sentido, Monocamadas Auto-Organizadas (SAMs) conjugadas a sistemas multivalentes, como dendrímeros contendo um número de geração, bem como, o uso de nanopartículas de ouro, serão combinados para melhorar as propriedades da superfície. Assim, essas metodologias de imobilização pretendem à formação de uma plataforma altamente organizada, possibilitando maior quantidade de moléculas antigênicas imobilizadas, como também, amplificação do sinal elétrico e/ou óptico. A caracterização dessas plataformas de imobilização será realizada pelas técnicas de Voltametria Cíclica (VC), Voltametria de Pulso Diferencial (VPD), Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIS), Microscopia Eletroquímica de Varredura (SECM) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Posteriormente, os antígenos serão adicionados sobre os organizados moleculares e a imobilização acompanhada em tempo real por SPR e QCM. As técnicas de VC, EIS e SECM serão usadas na caracterização do imunosensor. A sensibilidade e seletividade do sensor serão avaliadas pela adição sobre sua superfície de soros caninos positivos e negativos para a Leishmaniose Visceral (LV). Por fim, os resultados serão comparados aos métodos convencionais de detecção da LV.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SOUTO, DENIO E. P.; FONSECA, ALIANI M.; BARRAGAN, JOSE T. C.; LUZ, RITA DE C. S.; ANDRADE, HELIDA M.; DAMOS, FLAVIO S.; KUBOTA, LAURO T.. SPR analysis of the interaction between a recombinant protein of unknown function in Leishmania infantum immobilised on dendrimers and antibodies of the visceral leishmaniasis: A potential use in immunodiagnosis. BIOSENSORS & BIOELECTRONICS, v. 70, p. 275-281, AUG 15 2015. (12/24493-3)

SOUTO, DENIO E. P.; FARIA, ANGELICA R.; DE ANDRADE, HELIDA M.; KUBOTA, LAURO T.. Using QCM and SPR for the Kinetic Evaluation of the Binding Between A New Recombinant Chimeric Protein and Specific Antibodies of the Visceral Leishmaniasis. CURRENT PROTEIN & PEPTIDE SCIENCE, v. 16, n. 8, p. 782-790, 2015. (12/24493-3)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SOUTO, Dênio Emanuel Pires. Estudo da imobilização de antígenos de Leishmania infantum sobre plataformas organizadas empregando SPR e QCM para detecção de anticorpos específicos da Leishmaniose Visceral. 2016. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Química Campinas, SP.