Correlação entre ingestão de aflatoxina B1 na dieta, expressão hepática de genes e proteínas relacionadas à hepatocarcinogênese e concentração de AFB1-adutos no soro, urina e fígado de ratos Wistar

• Processo: 13/16794-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Leandra Náira Zambelli Ramalho
• Beneficiário: Rafaela Cristina Lopes Garcia
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/20895-4 - Avaliação de adutos AFB1-Lisina e AFB1-N7-guanina como biomarcadores de exposição humana e animal às aflatoxinas, AP.TEM
• Assunto(s): Anatomia patológica Transformação celular neoplásica Aflatoxina B1 Biotransformação Reação em cadeia da polimerase em tempo real Imuno-histoquímica Western blotting Modelos animais de doenças
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: AFB1-adutos | Aflatoxina | Carcinogênese | hepatocarcinoma | Micotoxina | Patologia Experimental

Resumo

As aflatoxinas são micotoxinas produzidas por fungos do gênero Aspergillus, que encontram no Brasil condições ideais para o seu crescimento, principalmente como contaminante de grãos e cereais. Essas substâncias, sobretudo a aflatoxina B1 (AFB1), possuem notório poder toxigênico. A AFB1 é altamente mutagênica e potente carcinógeno hepático para diferentes espécies, incluindo o ser humano. Após ingestão oral da AFB1, ocorre sua biotransformação no fígado e geração de metabólitos (adutos) que podem estar presentes em diferentes tecidos e fluidos corporais. Entretanto, ainda não foram estabelecidas correlações entre a ingestão de diferentes concentrações de AFB1 na dieta e os níveis de seus metabólitos no fígado, soro e urina, bem como a intensidade da expressão hepática de genes e proteínas relacionadas à hepatocarcinogênese. Ratos machos Wistar receberão AFB1 em diferentes doses por via oral, constituindo quatro grupos experimentais. Um grupo adicional receberá, além da AFB1, dieta contendo etanol a 5%. Animais-controle não serão expostos à micotoxina nem ao etanol. Após exposição crônica por 90 dias, os animais serão eutanasiados para a coleta de soro e parênquima hepático. A urina será coletada durante a última semana de exposição à toxina. Serão realizadas determinações dos níveis dos adutos da AFB1 no soro, na urina e no fígado, além das alterações na expressão hepática de genes e proteínas relacionadas ao processo de hepatocarcinogênese (p53, p21WAF1/Cip1, p27Kip1, Rb, p16INK4D, beta-catenina, ciclina D1, proibitina e glutationa-S-transferase-p1) por meios das técnicas de imuno-histoquímica, Western-blotting e PCR em tempo real. Alterações histopatológicas hepáticas (focos de hepatócitos alterados) e bioquímicas séricas também serão avaliadas.(AU)