A metilação do DNA em células HeLa após tratamento com ácido valpróico

• Processo: 14/23842-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2015
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Acordo de Cooperação: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
• Pesquisador responsável: Maria Luiza Silveira Mello
• Beneficiário: Giovana Maria Breda Veronezi
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/50015-6 - Estrutura e organização da cromatina com o envelhecimento e o diabetes frente a alterações induzidas em marcadores epigenéticos, AP.TEM
• Assunto(s): Cromatina Metilação de DNA Células HeLa Ácido valproico Citometria de fluxo Histona desacetilases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ácido valpróico | citometria de fluxo e imunofluorescência | DNA metilado | epigenética | Ft-Ir | supraorganização cromatínica | Cromatina

Resumo

O Ácido Valproico (VPA) é um inibidor de Deacetilases de Histonas (HDAC) bem conhecido. Recentemente, além de atuar na inibição de HDAC, o VPA está sendo considerado como agente indutor de demetilaçao do DNA em certos tipos celulares. No presente trabalho, o processo de demetilação de DNA induzido por tratamento com VPA será estudado em detalhe em células HeLa, nas quais foi reportada, por nosso grupo, remodelação da cromatina atribuída à inibição de HDAC. Dados prévios obtidos por análise de imagens serão expandidos para que padrões de remodelação cromatínica contribuídos por demetilação do DNA possam ser estabelecidos. Ensaios imunocitoquímicos e citometria de fluxo serão realizados para se quantificar a abundância da metilação de DNA. Além disso, serão obtidos Espectros de Infravermelho por Transformada de Fourier (FT-IR) com microespectroscopia para se detectar alterações espectrais que possam ocorrer por mudanças vibracionais na molécula do DNA por causa da demetilação de citosina. Uma vez que a ação do VPA pode estar associada à presença das enzimas Ten-Eleven Translocation Methylcytosine Dioxygenases (TET), os níveis de expressão gênica e a abundância dessas enzimas, bem como os níveis de DNA hidroximetilado, serão também estudados. Espera-se, com o presente projeto, que se revele um conhecimento mais aprofundado da ação dinâmica do VPA nos mecanismos de metilação/demetilação do DNA. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ROCHA, MARINA AMORIM; BREDA VERONEZI, GIOVANA MARIA; FELISBINO, MARINA BARRETO; VICCARI GATTI, MARIA SILVIA; TAMASHIRO, WIRLA M. S. C.; SILVEIRA MELLO, MARIA LUIZA. Sodium valproate and 5-aza-2 `-deoxycytidine differentially modulate DNA demethylation in G1 phase-arrested and proliferative HeLa cells. SCIENTIFIC REPORTS, v. 9, DEC 3 2019. (14/23842-0, 15/10356-2)

VERONEZI, GIOVANA M. B.; FELISBINO, MARINA BARRETO; GATTI, MARIA SILVIA V.; MELLO, MARIA LUIZA S.; VIDAL, BENEDICTO DE CAMPOS. DNA Methylation Changes in Valproic Acid-Treated HeLa Cells as Assessed by Image Analysis, Immunofluorescence and Vibrational Microspectroscopy. PLoS One, v. 12, n. 1, JAN 23 2017. (14/23842-0, 07/58251-8)

ROCHA, MARINA AMORIM; BREDA VERONEZI, GIOVANA MARIA; FELISBINO, MARINA BARRETO; VICCARI GATTI, MARIA SILVIA; TAMASHIRO, WIRLA M. S. C.; SILVEIRA MELLO, MARIA LUIZA. Sodium valproate and 5-aza-2 '-deoxycytidine differentially modulate DNA demethylation in G1 phase-arrested and proliferative HeLa cells. SCIENTIFIC REPORTS, v. 9, p. 12-pg., 2019-12-03. (14/23842-0, 15/10356-2)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

VERONEZI, Giovana Maria Breda. A metilação de DNA em células HeLa após tratamento com o ácido valproico. 2017. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.